一种新型大鼠结肠纵行肌细胞分离培养方法的建立
本文关键词:一种新型大鼠结肠纵行肌细胞分离培养方法的建立
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【摘要】:目的对大鼠结肠纵行肌细胞分离培养的方法进行改进,建立一种取材方便,纯度高的新型大鼠结肠纵行肌细胞的原代分离培养方法,并观察乙酰胆碱和去甲肾上腺素对结肠纵行肌细胞的作用,为结肠纵行肌生理、病理的研究提供细胞模型。方法取Wistar大鼠结肠,从外侧刮去外膜层,剥离外膜下结肠纵行肌,消化后过滤所剩组织进行贴块培养。观察乙酰胆碱和去甲肾上腺素对纵行肌细胞的作用,用NTS-Elements BR3.60分析软件进行分析。结果经α-SM-actin免疫组织化学染色确定培养的细胞为平滑肌细胞,且纯度高;乙酰胆碱对大鼠结肠纵行肌细胞具有收缩作用,当浓度为5.5×10-1μmol.L-1时,收缩作用最强。去甲肾上腺素对纵行肌细胞具有舒张作用,当浓度为4.86×10-2mmol.L-1时,舒张作用最强。结论从结肠外膜分离肠纵行肌层,消化后过滤,所剩组织进行贴块培养,此方法简便易行、纯度高,且对乙酰胆碱和去甲肾上腺素反应良好。
【作者单位】: 北京中医药大学基础医学院;北京中医药大学中药学院;北京中医药大学科技处;
【关键词】: 结肠纵行肌细胞 乙酰胆碱 去甲肾上腺素 大鼠 方法 细胞模型 细胞长度变化百分数
【基金】:国家自然科学基金资助项目(No 81073132) 校级自主课题(No 2011YJB22X5029)
【分类号】:R-332
【正文快照】: 近年来,胃肠动力方面的研究呈现出从整体水平到细胞水平至分子水平不断深入的趋势。研究的微观化,深入化,对体外细胞模型的要求也越来越高,所以,纯度高、操作简便易行的细胞分离培养方法,是目前体外细胞研究的需要。体外分离的细胞可排除扩散屏障,如神经递质、胃肠激素、药物
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