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体外合成修饰mRNA可转染hUC-MSCs

发布时间:2017-10-18 16:14

  本文关键词:体外合成修饰mRNA可转染hUC-MSCs


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【摘要】:目的探讨体外合成修饰的mRNA能否稳定高效的转入人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)中,为利用mRNA诱导分化hUC-MSC进行细胞治疗奠定基础。方法体外构建合成mRNA的模板并合成eGFP的修饰mRNA,将其转入hUC-MSCs,流式检测转染效率、最佳转染剂量及mRNA在细胞中的半衰期。相同方法合成hPdx1修饰mRNA转染hUC-MSCs,免疫荧光检测转染效果。结果体外合成的eGFP修饰mRNA可高效转入hUC-MSCs,最佳转染剂量为1.5μg/mL,转染后翻译的蛋白在细胞中可稳定存在3 d。hPdx1的修饰mRNA也可稳定地导入hUC-MSCs。结论体外合成的修饰mRNA稳定性好,可进入细胞并翻译成蛋白。
【作者单位】: 湖北医药学院附属太和医院胚胎干细胞研究湖北省重点实验室;朝鲜国家科学院生物工程实验室;武汉大学中南医院;
【关键词】修饰mRNA hUC-MSC 转染效率
【基金】:国家自然科学基金(81070614) 湖北医药学院自然科学研究启动金(2011QDZR-26)
【分类号】:R346
【正文快照】: 虽然医学发展快速,但迄今仍有一些疾病无法治愈。以细胞分化为基础的再生医学为细胞治疗的临床运用奠定了基础。目前对于细胞分化的研究主要是以质粒[1]、病毒[2]、蛋白[3]等作用方式将外源分化因子转入细胞内,但用这些方法进行细胞重编程得到的具有运用价值的细胞都存在一定

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3 张锐;王f,

本文编号:1055903


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