软骨细胞外基质对脐带Wharton胶间充质干细胞生物学性状的作用

发布时间：2017-10-19 20:36

本文关键词：软骨细胞外基质对脐带Wharton胶间充质干细胞生物学性状的作用

【摘要】：[目的]探讨软骨细胞外基质微环境对源于人脐带Wharton胶的间充质干细胞增殖的影响,观察该微环境促进干细胞向软骨细胞方向分化的潜能。[方法]①取3%(w/v)猪关节软骨细胞外基质和2.4%(w/v)海藻酸盐为原料,按体积比1∶1的比例充分混合,将其用带16 G针头的1 ml注射器匀速滴入氯化钙溶液制作软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球,通过扫描电镜观察该微球内部结构。②将人脐带Wharton胶中间质干细胞(WJMSCs)混于软骨细胞外基质/海藻酸混合液,滴入氯化钙溶液形成复合干细胞的混合凝胶微球进行培养,设为实验组;同理WJMSCs混合于单纯藻酸盐凝胶并形成微球作为对照组。③通过扫描电镜和FDA-PI染色观察上述两组微球内细胞的生长粘附情况,体外培养4周,经组织学和DNA测定观察干细胞的表型及增殖情况。[结果]①构建的软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球呈半透明乳白色,内部具有较多不规则的孔隙结构,具有三维立体培养细胞的环境特点。②比较实验组和对照组不同细胞培养时间段细胞增殖量,发现实验组细胞增殖率高于对照组,第28 d时两组细胞DNA含量的差异有统计学意义,(P㩳0.05)。③实验组中细胞呈圆形或椭圆形,形成明显的软骨陷窝样的结构,有大量细胞外基质分泌,对照组中细胞呈圆形,陷窝样的结构不明显。④组织学染色观察发现:实验组中培养的干细胞明显有向软骨细胞方向分化的趋势。[结论]软骨细胞外基质微环境不仅利于人脐带Wharton胶中间质干细胞的增殖,而且具有将WJMSCs向软骨细胞方向诱导分化的潜能。
【作者单位】：解放军总医院骨科研究所;黑龙江佳木斯大学附属第一医院;
【关键词】： 脐带Wharton胶间充质干细胞 软骨细胞外基质 藻酸盐 软骨组织工程
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:30973047,81000810,81071458) 863计划项目(编号:2102AA020502)
【分类号】：R329
【正文快照】： 虽然自体软骨细胞是软骨组织工程的最佳种子细胞,然而因其来源和增殖潜力有限,且培养过程中容易失去软骨细胞表型,形成纤维样细胞[1]等问题,限制了其应用。因此具有多向分化功能的干细胞成了组织工程软骨种子细胞研究开发的目标,然而如何搭建将干细胞向软骨细胞方向分化的环境

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