表达mIFN-γ的重组链球菌的构建及其对重组Sj-F1链球菌疫苗免疫调节作用研究
本文关键词:表达mIFN-γ的重组链球菌的构建及其对重组Sj-F1链球菌疫苗免疫调节作用研究
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【摘要】:目的构建表达mIFN-γ的重组链球菌,并与重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗进行联合免疫,观察IFN-γ对重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗的免疫调节效应。方法用PCR法扩增mIFN-γ基因,亚克隆至链球菌重组质粒pGMB1,经PCR、限制性酶切和测序鉴定筛选阳性重组子。将阳性重组质粒转化链球菌载体,经抗生素抗性转化及染色体PCR鉴定筛选阳性重组链球菌。用Streak blot和Western blot分析鉴定重组链球菌的表达情况。鉴定后的重组mIFN-γ链球菌与重组Sj-F1链球菌疫苗联合应用,经滴鼻接种免疫昆明小鼠,观察诱导产生的减虫和减卵效果。结果成功构建了分泌mIFN-γ重组链球菌。Streak blot和Western blot分析表明重组链球菌能分泌mIFN-γ并可稳定遗传。免疫保护性实验表明,重组mIFN-γ链球菌与重组日本血吸虫Sj-F1链球菌疫苗联合免疫,减虫率和减卵率分别为31.56%和47.48%,与单用重组Sj-F1链球菌疫苗比较减虫率和减卵率W4增加。结论结果表明,重组mIFN-γ链球菌能增强重组Sj-F1链球菌疫苗抗日本血吸虫感染的保护力。
【作者单位】: 中南大学湘雅医学院微生物学系;
【关键词】: 日本血吸虫 mIFN-γ Sj-F 重组链球菌 免疫
【基金】:湖南省自然科学基金重点项目(No:10JJ2012) 湖南省研究生科研创新项目(No:2011ssxt103)
【分类号】:R392.1
【正文快照】: IFN-γ是一种重要的Th1型细胞因子,能诱导Th0细胞分化成Th1细胞,增加抗原提呈细胞MHCⅡ类分子的表达,并抑制Th2型细胞因子产生,使免疫应答呈现Th1应答优势,从而发挥抗感染、抗肿瘤及免疫调节作用[1-2]。在小鼠血吸虫感染中,IFN-γ可通过激发对童虫的细胞毒作用和抑制肝纤维化
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