小鼠骨髓间充质干细胞分离培养新方法

发布时间：2017-10-25 06:16

  本文关键词：小鼠骨髓间充质干细胞分离培养新方法

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【摘要】：本研究旨在建立一种方便、快捷、有效体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的方法。在无菌条件下取小鼠股骨、胫骨,分别用全骨髓贴壁法、骨片消化法、骨髓加骨片法分离小鼠MSC,比较MSC集落出现时间、大小及数量;应用流式细胞术检测细胞免疫表型,并进行MSC成骨、成脂分化鉴定。结果表明,骨髓加骨片法出现的集落时间最早,集落数量最多,第4天集落数为20±4个;骨片消化法为11.5±2.5个;全骨髓贴壁法最少,为9.5±1.5个;到第3代时,骨髓加骨片法获得细胞数量最多,是全骨髓贴壁法和骨片消化法的2倍;流式细胞术检测结果显示,获得的细胞高表达干细胞标志之一Sca-1,高表达CD44、CD29,不表达白细胞表面抗原CD45和内皮细胞标志CD31等;所分离的MSC在成骨诱导体系和成脂诱导体系中能分别向成骨细胞和脂肪细胞分化,具有典型的MSC特性。结论:骨髓加骨片法是一种方便、快捷、有效的小鼠骨髓MSC分离方法。
【作者单位】： 中国人民解放军总医院口腔科;中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所;
【关键词】： 间充质干细胞 骨髓加骨片法 小鼠
【基金】：国家重点基础研究发展计划"973计划"(编号2010CB529904) "863"重大专项(编号2011AA020114) 国家自然科学基金面上项目(编号81271936,81070393,81170523,81170461,31170926)
【分类号】：R329.28
【正文快照】： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是骨髓中除造血干细胞外另一重要的干细胞。MSC具有自我更新、多向分化、免疫调控和支持造血的能力,而且来源广泛,容易在体外培养和扩增,目前已经应用于临床并显示了良好的治疗效果[1-3]。虽然MSC临床应用广泛,但许多关键问题如免疫

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本文编号：1092426