大鼠髓系来源的树突状细胞的体外诱导及功能鉴定
本文关键词:大鼠髓系来源的树突状细胞的体外诱导及功能鉴定
【摘要】:目的探讨建立合适的大鼠骨髓源性未成熟树突状细胞(imDC)的培养方法,并对其生物学特性进行评价。方法分别以不同剂量的粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素(IL)-4诱导分化获得大鼠骨髓源性树突状细胞(DC),比较收获率及特异性标记蛋白(OX62)阳性的DC数量,获得最佳细胞因子浓度。并用流式细胞仪分析DC表型,混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激同种T细胞增殖能力,ELISA法测定MLR上清IL-12、γ-免疫反应性纤维结合素(IFN-γ)水平。结果 GM-CSF 5 ng/ml可诱导出更高的收获率及OX62的阳性率。GM-CSF 5 ng/ml培养7 d的DC,表达中等水平的主要组织相容性(抗原)复合物Ⅱ类(MHC II)和低水平的CD86;其分泌少量IL-12;刺激同种T细胞增殖能力极低。脂多糖(LPS)刺激后MHCⅡ、CD86表达明显增加;分泌IL-12和IFN-γ增加;刺激同种T细胞增殖能力增强。结论 GM-CSF 5 ng/ml为诱导大鼠骨髓源性imDC的最佳剂量,培养7~9 d可以获得足够数量和纯度的imDC。
【作者单位】: 安徽医科大学第二附属医院普通外科;苏州大学第一附属医院普通外科;
【关键词】: 大鼠 骨髓 未成熟树突状细胞 诱导
【基金】:江苏省自然科学基金(编号:BK2007057)
【分类号】:R392
【正文快照】: 树突状细胞(dendritic cell,DC)是已知的体内功能最强的专职抗原递呈细胞(antigen presentingcell,APC),来源于CD34+骨髓前体细胞。目前在大鼠DC的分离、培养及鉴定方面研究甚少,尤其是如何获得纯度较高、状态稳定的大鼠未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)未见
【参考文献】
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