TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制

发布时间：2017-10-27 15:15

  本文关键词：TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制

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【摘要】：目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。
【作者单位】： 重庆医科大学脂糖代谢性疾病重庆市重点实验室脂质研究中心;
【关键词】： HepG细胞 肿瘤坏死因子 肝X受体α 胆固醇外流
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81070631;No.81070317;重点项目No.81030008)
【分类号】：R363
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liverdisease,NAFLD)是由多种原因引起的肝细胞内中性脂肪(主要是甘油三酯和胆固醇酯)过度堆积的代谢性疾病。肝脏脂质代谢稳态的紊乱是构成各种形式脂肪肝的基础,而炎症在促进肝细胞脂代谢紊乱中扮演重要角色。在生理状态下肝脏内胆

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本文编号：1104044