小鼠骨髓来源巨噬细胞体外培养及极化相关实验方法的建立

发布时间：2017-11-02 15:01

  本文关键词：小鼠骨髓来源巨噬细胞体外培养及极化相关实验方法的建立

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【摘要】：目的建立小鼠骨髓来源巨噬细胞体外培养,并将其极化为M1和M2型巨噬细胞的方法。方法获取小鼠骨髓细胞,以GM-CSF诱导其中单核细胞向巨噬细胞分化发育,并辅以LPS和IFN-γ以及IL-4刺激巨噬细胞分别向M1型和M2型分化。采用流式细胞术、实时定量PCR和ELISA的实验检测极化后细胞内以及细胞培养上清中的标志性细胞因子如IL-12、IL-10、Arg1、Ym1、MMR等的表达情况。结果形态学观察发现骨髓获取的细胞经诱导分化后呈现巨噬细胞特征性的贴壁形态;流式细胞术行胞内染色表明,极化后的M1型与M2型巨噬细胞各自表达其特征性的细胞因子IL-12和Arg1;实时定量PCR和ELISA分别检测所培养细胞胞内以及培养上清中的细胞因子,结果表明所刺激的M1型巨噬细胞高表达IL-12、iNOS、TNF-α等炎性因子,而M2型巨噬细胞表达MMR、Arg1、Ym1等标志因子。结论建立了稳定的M1和M2型巨噬细胞体外培养体系。
【作者单位】： 第四军医大学基础部医学遗传与发育生物学教研室;第四军医大学唐都医院呼吸内科;
【关键词】： 巨噬细胞 巨噬细胞极化 体外培养
【基金】：国家自然科学基金(31130019)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 巨噬细胞是一类在体内发挥重要免疫效应的细胞,为体内的稳态维持和组织防御提供保障。一方面它可以通过吞噬作用直接吞噬降解病原微生物和异源物质,另一方面其可通过与多种其他的免疫细胞如NK细胞、T细胞相互作用从而发挥进一步的防御功能[1]。巨噬细胞的极化是近年来提出的

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本文编号：1132025