麻疹病毒HA基因克隆和表达的研究

发布时间：2017-11-03 13:01

  本文关键词：麻疹病毒HA基因克隆和表达的研究

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【摘要】：目的构建麻疹病毒血凝素蛋白基因的重组质粒,使其在大肠埃希菌中表达HA蛋白,为麻疹病毒诊断奠定基础。方法从麻疹病毒株MV07-30中提取核糖核酸,用RT-PCR扩增HA基因,用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切HA基因片段和pGEM-Teasy载体,连接后获得重组质粒pGEM-Teasy-MVHA并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+);用IPTG诱导重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术进行重组蛋白表达的分析;通过Ni-NTA亲和层析获得高纯度目的蛋白。结果 RT-PCR获得的HA基因片段约长1700 bp。转化的大肠杆菌表达产物在SDS-PAGE中出现与目的蛋白分子量相一致的条带,且重组蛋白主要以包涵体形式存在;血凝及血凝抑制实验显示表达产物具有良好的抗原性。结论构建麻疹病毒HA基因的原核表达体系,纯化的重组蛋白可用作麻疹病毒检测的抗原。
【作者单位】： 福州市疾病预防控制中心;福州大学生物工程与科学学院;
【关键词】： 麻疹病毒 血凝素 基因克隆 原核表达
【基金】：福州市科技局(2009-S-93)
【分类号】：R373
【正文快照】： 麻疹是由麻疹病毒引起的以发热、全身斑丘疹为特征的急性病毒性传染病,该病传染性强,危害大,发病严重时可引起死亡,严重危害儿童健康。自麻疹减毒活疫苗使用以来,其发病率、死亡率大为下降,但麻疹仍是严重威胁儿童健康的公共卫生问题之一。麻疹病毒(MV)是一种单股负链核糖核酸

【共引文献】

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本文编号：1136276