利用改良后的脾内免疫和半固体培养基法制备单克隆抗体

发布时间：2017-11-03 19:33

  本文关键词：利用改良后的脾内免疫和半固体培养基法制备单克隆抗体

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【摘要】：旨在利用改良后的脾内免疫和半固体培养基法制备单克隆抗体,节约免疫原用量、简化试验操作、一步法筛选和克隆杂交瘤细胞、缩短单抗制备周期。通过局部麻醉小鼠脾脏区域皮肤,切开后透过腹膜直接向脾脏内注射微量抗原,使小鼠的脾细胞在短时间内产生免疫反应,尾静脉注射强化免疫后进行细胞融合;选取半固体培养基(甲基纤维素、软琼脂)法,以有限稀释法作对照筛选分泌高效价抗体的杂交瘤细胞。结果显示,与传统的单抗制备方法相比,改进后的脾内免疫操作更简单,联合尾静脉注射,使用微量免疫原在短时间内产生高效价抗体;半固体培养基甲基纤维素浓度在1.1%条件下,获得克隆团较多,阳性率较高。本研究方法适用于大规模制备单克隆抗体。
【作者单位】： 郑州大学生物工程系;郑州职业技术学院;河南师范大学生命科学学院;河南省生物工程技术研究中心;
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 自从1975年杂交瘤技术创建以来,单克隆抗体对于免疫学、检验医学、抗独特型疫苗、生物导弹治疗、食品及农产品检验等多领域的发展都起到重要的推动作用。但目前大多数实验室制备单克隆抗体沿用腹腔注射、有限稀释等常规方法,耗时、费力,不适合大规模操作制备单抗。国内外均有

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本文编号：1137644