确证家兔外周血中存在具有多向分化能力的间充质干细胞
本文关键词:确证家兔外周血中存在具有多向分化能力的间充质干细胞
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【摘要】:本研究确证家兔外周血中存在具有多向分化潜能的间充质干细胞(MSC)。取成年新西兰大白兔,经每日皮下注射粒细胞集落刺激因子30μg/kg动员6 d后采集外周血样品,用Ficoll密度梯度离心和贴壁培养法分离纯化外周血间充质干细胞(PBMSC),镜下观察其生长形态并绘制增殖曲线;流式细胞术分析其表型特征;并分别对培养的PBMSC进行成骨、成软骨及成脂细胞诱导分化能力鉴定。结果表明:①原代培养24 h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3-4 d后出现集落样生长,传代培养的PBMSC形态均一、呈长梭形漩涡状生长;②PBMSC增殖能力旺盛,培养2 d后进入对数生长期,细胞倍增时间为37.4 h;③流式细胞术检测显示,培养的PBMSC高表达CD29,不表达CD14;④PBMSC经成骨诱导培养21 d后,茜素红染色显示有明显的钙结节形成;经微团无血清软骨培养体系诱导培养21 d后,细胞团切片,阿利新蓝染色呈强阳性反应;经成脂诱导培养21 d后,油红染色显示诱导细胞胞浆内有大量脂滴。结论:成功从兔外周血中分离培养了PBMSC,在适宜诱导培养条件下具有向成骨、成软骨、成脂分化的能力。
【作者单位】: 遵义医学院暨附属医院贵州省细胞工程重点实验室;遵义医学院暨附属医院人体解剖学教研室;遵义医学院暨附属医院形态学实验室;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(编号81060148)
【分类号】:R329.28
【正文快照】: 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)广泛存在于多种成体和胚胎组织中,除适宜条件下具有多向分化能力外,还具有体外扩增能力强、抗原性弱的特点,被认为是组织损伤性疾病治疗的理想种子细胞来源[1-3]。目前为止,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMM
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,本文编号:1142242
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