用酶解法制备壳寡糖及其对机体免疫功能的调节作用

发布时间：2017-11-09 19:16

  本文关键词：用酶解法制备壳寡糖及其对机体免疫功能的调节作用

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【摘要】：目的:研究本课题组酶解制备的主要含3-7聚合度壳寡糖(COS)对机体免疫功能的调节作用。方法:利用本课题组分离的高活性壳聚糖酶通过酶水解法制备壳寡糖,HPLC法对壳寡糖的成分进行鉴定,并用异硫氰酸荧光素(FITC)将壳寡糖进行荧光标记得到FITC-COS,研究小鼠腹腔巨噬细胞对壳寡糖的吞噬作用及其与Toll样受体4(TLR4)的关系,进一步研究了不同浓度壳寡糖对小鼠腹腔巨噬细胞的增殖,吞噬中性红能力及分泌TNF-α能力的影响,并对小鼠灌胃不同剂量的壳寡糖,研究了壳寡糖对小鼠血清IgG和IgM含量及小鼠胸腺、脾脏指数的影响。结果:HPLC分析结果显示壳聚糖酶水解法制备的COS主要为3-7单糖聚合度的寡糖。将FITC-COS作用于小鼠腹腔巨噬细胞不同时间后,荧光显微镜观察结果表明巨噬细胞能够吞噬COS,随着时间的延长吞噬COS的量增加,TLR4单克隆抗体预处理巨噬细胞1小时后再加入FITC-COS,巨噬细胞对COS的吞噬作用几乎完全被抑制。COS被巨噬细胞吞噬后可显著增强巨噬细胞的吞噬功能,刺激巨噬细胞分泌TNF-α。体内研究结果表明小鼠灌胃COS能够显著增加小鼠的脾脏指数,增加血清中IgG的含量,对胸腺指数和血清中IgM的含量没有显著影响。结论:壳寡糖(3-7聚合度)能够被巨噬细胞吞噬,进而激活巨噬细胞,具有较好的体外、体内免疫调节功能,壳寡糖对巨噬细胞的激活是通过细胞表面TLR4受体介导的。
【作者单位】： 中国海洋大学海洋生命学院;江苏省淮海工学院海洋学院;
【基金】：山东省青岛市科技项目支持[12-1-4-1-(23)-jch]
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 壳寡糖(COS)是壳聚糖的降解产物,由2～10个氨基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接而成。壳寡糖作为自然界中唯一大量存在的碱性氨基寡糖,由于具有分子量低、水溶性好、易吸收等特性,在提高免疫力、抗肿瘤、抗菌、促进伤口愈合等方面具有较好的生物学功能[1,2]。近年来,随着研究的深

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本文编号：1163219