不同标记方法对大鼠骨髓间充质干细胞标记的研究

发布时间：2017-11-10 04:12

  本文关键词：不同标记方法对大鼠骨髓间充质干细胞标记的研究

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【摘要】：目的观察Hoechest33342、BrdU、DAPI对大鼠BMSCs标记情况,比较其标记效果的差异性;培养转基因绿色荧光小鼠的BMSCs,观察细胞生长情况和其荧光持续时间,比较其与荧光标记后的干细胞之间的优越性。方法贴壁筛选提取大鼠BMSCs,培养至第三代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色;Hoechest33342、BrdU、DAPI标记大鼠BMSCs,检测标记后的大鼠BMSCs增殖率,显微镜下观察其荧光持续时间;观察转基因绿色荧光小鼠BMSCs在培养的不同时间段的细胞形态、荧光持续时间以及同上边3种标记方法比较的优缺点。结果 Hoechest33342、BrdU、DAPI可用于对BMSCs的标记;BrdU标记过程较长,在前期不存在荧光猝灭缺点,标记后经过荧光免疫组化处理后可见阳性细胞,Hoechest33342、DAPI标记过程较短,荧光持续时间较长,但此过程中必须避光,对操作带来了一定的困难。3种方法标记后对细胞增殖率无影响;转基因小鼠BMSCs生长较大鼠干细胞生长较慢,其优点是不用标记且荧光持续时间较长,用于细胞追踪研究更为方便可行。结论干细胞有多向分化的潜能,因此有很好的研究价值和应用价值,对干细胞进行标记,为干细胞迁移、归巢机制的研究提供更好的研究平台。
【作者单位】： 甘肃省中医院;甘肃中医学院第一附属医院;甘肃中医学院;
【基金】：国家自然基金项目(81060299)
【分类号】：R329
【正文快照】： 骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是一类来源于中胚层的未分化间充质干细胞,在体内外均具有多向分化潜能和较强的增殖能力[1,2],是组织工程的首选种子细胞,也是移植领域应用前景广阔的再生来源细胞[3,10]。对于BMSCs标记的研究,是目前研究干细胞迁

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1165008