布鲁氏菌部分毒力相关调控因子免疫原性检测与保护性评价

发布时间：2017-11-11 22:32

  本文关键词：布鲁氏菌部分毒力相关调控因子免疫原性检测与保护性评价

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【摘要】：目的检测部分布鲁氏菌毒力相关调控因子刺激机体产生细胞免疫反应的能力,并对具有细胞免疫原性蛋白的免疫保护性进行初步评价。方法利用Gateway的方法将9个布鲁氏菌毒力相关转录调控因子克隆至表达载体pHXGWA上并利用Ni-NAT层析的方法纯化重组蛋白。构建布鲁氏菌疫苗株S19株免疫的BALB/c小鼠模型,免疫35d后分离小鼠脾细胞并用体外重组蛋白再刺激,ELISA方法检测蛋白体再刺激后小鼠脾细胞分泌的细胞因子IFN-γ水平,了解毒力相关调控因子刺激机体产生细胞免疫反应情况。以CpG-ODN为免疫佐剂,用具有细胞免疫活性蛋白免疫小鼠,观察对布鲁氏菌强毒株544攻击感染的免疫保护作用。结果 7个布鲁氏菌毒力相关调控因子在大肠埃希菌中得以表达。其中BMEⅠ1573及BMEⅡ0475再刺激下S19免疫小鼠脾细胞产生的IFN-γ水平高于PBS对照小鼠。而在以CpG-ODN为免疫佐剂时,两者均不具有免疫保护性。结论布鲁氏菌LysR家族及GntR家族的转录因子BMEⅠ1573及BMEⅡ0475具有细胞免疫原性,初步检测无免疫保护作用。
【作者单位】： 湖北医药学院附属人民医院感染性疾病科;湖北医药学院微生物教研室;
【基金】：湖北省卫生厅青年科技人才项目(No.QJX2010-24) 湖北省教育厅重点项目(No.D20122407)
【分类号】：R392
【正文快照】： 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的能够在人和动物中传播的一类人兽共患病,近几年发病人数有所增加[1,2]。亚单位疫苗是布鲁氏菌疫苗研究的一个重要方向。布鲁氏菌为胞内寄生菌,细菌侵入机体后能够进入单核巨噬细胞系并在其吞噬溶酶体里繁殖。因此像许多其他胞内菌一样,细胞介导的

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