小凹蛋白1上调人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导一氧化氮合酶激活的机制

发布时间：2017-11-16 11:46

  本文关键词：小凹蛋白1上调人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导一氧化氮合酶激活的机制

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【摘要】：目的探讨小凹蛋白1(Cav-1)上调人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)激活的作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,取同代细胞随机分为:(1)对照组;(2)钙敏感受体激动剂精胺(2.0 mmol/L)+Ca2+组;(3)Caveolae结构破坏剂(Filipin,1.5 mg/L)+精胺+Ca2+组;(4)Cav-1 ShRNA+精胺+Ca2+组;(5)空质粒+精胺+Ca2+组;(6)Filipin不同浓度(1.5、2.0、2.5 mg/L)组。免疫印迹检测人脐静脉内皮细胞中eNOS和磷酸化eNOS(p-eNOS)、Cav-1以及eNOS膜蛋白表达;免疫荧光和免疫共沉淀技术检测Cav-1和eNOS表达、共定位以及相互作用。结果不同浓度Filipin不影响eNOS和p-eNOS蛋白表达(P0.05);精胺作用下细胞内p-eNOS表达增加(P0.05),此作用可被Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默完全阻断(P0.05);Fili-pin(1.5 mg/L)或Cav-1干扰处理后,eNOS的膜蛋白表达减少(P0.05),eNOS的蛋白表达无变化(P0.05);免疫荧光双标显示Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默后eNOS在小凹定位减少,核周边局部区域聚集增多。与对照组和精胺+Ca2+组比较,Cav-1 ShRNA处理组Cav-1和eNOS相互作用减弱(P0.05),其他处理组间的相互作用无统计学意义(P0.05)。结论人脐静脉内皮细胞中Cav-1上调钙敏感受体介导eNOS激活作用机制可能与Cav-1影响eNOS质膜定位及抑制eNOS向细胞器转位有关。
【作者单位】： 新疆石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室;新疆石河子大学医学院病理生理教研室;新疆石河子大学医学院医学机能实验中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30860099)
【分类号】：R363
【正文快照】： 内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxidesynthase,eNOS)通过促使一氧化氮(nitric oxide,NO)的合成,在维持血管张力从而调节血压等方面发挥重要作用。在血管内皮细胞,eNOS主要富集于细胞膜小凹和高尔基复合体。小凹蛋白1(caveolin-1,Cav-1)作为小凹表面标志蛋白和结构蛋

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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【相似文献】

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