新西兰兔骨髓间充质干细胞-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系的构建及体外评价

发布时间：2017-11-17 12:03

  本文关键词：新西兰兔骨髓间充质干细胞-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系的构建及体外评价

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【摘要】：目的构建新西兰兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系,研究BMSCs的生长和分化情况。方法分别构建BMSCs-藻酸钙三维培养体系(W组)及BMSCs-庆大霉素-藻酸钙三维缓释培养体系(U组),在37℃、饱和湿度、5%CO_2培养箱内培养,培养液为高糖DMEM(含15%胎牛血清、10ng/mL转化生长因子β_1),隔日换液,观察细胞形态变化及凝珠形态变化。第2、4、6周对凝珠进行H-E染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原染色。结果两组三维凝珠培养第10天局部有细胞团簇形成;第21天可见大量细胞团簇形成,BMSCs多保持圆球形或类球形。两组细胞增殖及生长能力差异无统计学意义(P0.05)。培养2周,两组凝珠甲苯胺蓝染色均呈阳性,但无明显细胞外基质形成,Ⅱ型胶原抗体染色均呈弱阳性;培养4周,两组凝珠甲苯胺蓝染色均显示位于细胞团块外周的细胞呈蓝色,中央的细胞染色不明显,细胞团外周蓝色染色物质较少,中央有较多紫红色物质,Ⅱ型胶原抗体染色均呈强阳性。H-E染色、甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原抗体染色均未发现两组BMSCs的转化生长有差异,增殖数量差异也无统计学意义。结论适量的庆大霉素局部缓释并未明显影响BMSCs的生长及转化,又可达到最小抑菌浓度;庆大霉素对BMSCs及软骨细胞超微结构的影响有待进一步探讨。
【作者单位】： 第二军医大学长海医院骨科;解放军169中心医院骨科;
【基金】：上海市自然科学基金(10411960400)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 兔骨髓l句充质干细胞(bone mesenchymal StemCells，，BMSCs卜藻酸钙三维培养体系的构建已有很多成功的范例，通过三维培养更易诱导细胞向软骨细胞分化生长，逐步形成新生软骨，以达到修复软骨缺损的目的!’1〕。我们前期的实验已成功研制出庆大霉素一藻酸钙缓释微球，并测定了

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本文编号：1195930