同一供者及不同供者的人胎盘MSCs与脐静脉内皮细胞复合培养的比较研究

发布时间：2017-11-18 17:01

  本文关键词：同一供者及不同供者的人胎盘MSCs与脐静脉内皮细胞复合培养的比较研究

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【摘要】：目的比较同一供者及不同供者的人胎盘MSCs(human placenta-derived MSCs,HPMSCs)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)三维复合培养效果,为体外构建三维血管化组织工程骨提供实验依据。方法取健康足月产妇自愿捐赠的胎盘及脐带组织,采用Ⅳ型胶原酶消化和人淋巴细胞分层液密度梯度离心法分离培养HPMSCs,通过流式细胞学检测细胞表型,取第2代细胞向成骨细胞诱导培养鉴定;以Ⅰ型胶原酶消化分离培养HUVECs,通过Ⅷ因子相关抗原因子免疫组织化学染色进行鉴定。实验分为两组,A组取不同供者的第3代HUVECs和成骨诱导培养3周的第3代HPMSCs以1∶1比例复合种植于胶原水凝胶,制备细胞-胶原水凝胶复合物;B组将同一供者的以上两种细胞同法复合制备复合物。复合培养第1、3、5、7天取材,行CD31免疫荧光染色,于激光共聚焦显微镜下观察其成血管倾向,测量复合物中的索道长度和节点数,并进行统计学分析。结果经鉴定,成功分离培养HPMSCs及HUVECs。CD31免疫荧光染色示,与A组相比,B组细胞-胶原水凝胶复合物中的HUVECs可在三维空间上较早、较好地伸展,在水凝胶内部相互交织能力较强,形成的索道更长,节点更多,网络更密集。第7天时B组索道长度和节点数分别为(8.11±0.62)mm/mm2及(21.30±1.41)个/mm2,显著优于A组的(6.68±0.35)mm/mm2及(17.10±1.10)个/mm2,差异均有统计学意义(t=0.894,P=0.000;t=0.732,P=0.000)。结论将同一供者的HPMSCs与HUVECs体外复合种植于胶原水凝胶支架上,比不同供者来源的细胞形成的网络成血管倾向更明显,交织连续性好,层次丰富。
【作者单位】： 四川大学华西医院骨科;
【基金】：国家教育部留学回国人员启动基金资助项目[教外司留(2012)940号]~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 组织工程骨的血管化是目前研究骨缺损修复的热点之一,选取具有良好生物相容性和生物功能性的种子细胞,较早地进行血管化,是促进植入体成功修复缺损的关键因素之一[1-3]。相比BMSCs,目前研究尚处于起步阶段的人胎盘MSCs(human placenta-derivedMSCs,HPMSCs),具有取材简便、创

【共引文献】

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