HCMV体外感染小鼠胚胎成纤维细胞的研究

发布时间：2017-11-19 05:25

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【摘要】：目的观察人巨细胞病毒(HCMV)AD169株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的生物学特征,为探讨HCMVAD169株能跨种属感染MEF提供依据。方法将100TCID50HCMV AD169株病毒悬液接种至MEF和人胚胎成纤维细胞(HF)上,逐日观察HCMV特征性细胞病变效应(CPE);分别收集感染后1、3、5 d的MEF和HF培养物,提取细胞DNA,采用实时荧光定量PCR检测HCMV立即早期基因(IE)拷贝数变化;分别采用HCMV立即早期基因(IE-1)、主要衣壳蛋白(MCP)和包膜糖蛋白(gB)单克隆抗体进行间接免疫荧光实验检测感染后的1、3、5 d MEF和HF中相应病毒蛋白的表达。结果观察到HCMV AD169株接种MEF出现病毒所致CPE,与HF出现的CPE相似;实时荧光定量PCR检测HCMV IE基因拷贝数发现,MEF在HCMVAD169感染后的1、3、5 d,病毒基因拷贝数呈增长趋势,但均低于相同时间点的HF中病毒拷贝数;间接免疫荧光检测HCMV感染MEF和HF后1、3、5 d HCMV IE-1、MCP和gB蛋白表达情况时发现,在MEF上HCMV IE-1、MCP和gB蛋白表达随时间延长呈增强趋势。结论 HCMV AD169株可以体外感染MEF,并在其中复制增殖。
【作者单位】： 安徽医科大学微生物学教研室;哥伦比亚大学病理与细胞生物学系;
【基金】：安徽省科技厅科技攻关项目(编号:08010302179)
【分类号】：R373
【正文快照】： 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)2012-11-02接收属β疱疹病毒亚科,基因组为线性双链DNA,全长约240 kb。HCMV在人群中感染非常普遍,发达国家的血清阳性率达30%～90%[1]。虽然大部分人呈临床隐性感染或潜伏感染[2],但在免疫功能不全的情况下,HCMV常被再激活而引起严

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 黄维;王明丽;吴喜林;刘倩;陈敬贤;;人巨细胞病毒原发感染BALB/c小鼠大脑皮质模型的建立[J];安徽医科大学学报;2007年06期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 常宏伟;汤仁树;陈伟;俞海洋;范玉珍;李朝阳;王明丽;;六安地区手足口病患儿肠道病毒分离鉴定与临床表现[J];安徽医科大学学报;2009年02期

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1 黄维;体内外感染BALB/c小鼠HCMV分离株UL83、UL54基因遗传变异的研究[D];安徽医科大学;2008年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 王明丽,陈贵海,唐久来,史百芬,胡勇,汪红俊,李京培,任斌;人巨细胞病毒感染新生乳鼠原代培养脑神经细胞研究[J];病毒学报;1999年02期

2 王明丽,唐久来,胡闻,史百芬,胡勇,毕克菊,李京培;人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立[J];动物学报;2000年02期

3 蔡亦红;高荣保;王明丽;;人巨细胞病毒增殖性感染新生乳鼠大脑皮质神经细胞[J];安徽医科大学学报;2006年03期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郑育声,谢琪璇,潘善培,芦春斌,肖銮娟;人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建[J];第三军医大学学报;2002年06期

2 许利军,吴南屏;人巨细胞病毒蛋白pp71的研究进展[J];国外医学.流行病学.传染病学分册;2004年06期

3 王本旭,柳川,邵宁生,沈倍奋;人巨细胞病毒疫苗研究进展[J];中国病毒学;2005年04期

4 赵俊;王明丽;;人巨细胞病毒感染对宿主细胞凋亡影响的研究进展[J];国际病毒学杂志;2006年06期

5 叶正中;张玫瑰;陈严;冯婉玲;钟洁华;;人巨细胞病毒在人胚肺细胞内的形态发生研究[J];电子显微学报;1990年03期

6 吴均,陈俊杰,唐泽媛,顾建人,万大方,马安卿,曲淑敏,李宏年;人巨细胞病毒糖蛋白52kD抗原编码区段在大肠杆菌中高效表达[J];生物化学与生物物理进展;1992年02期

7 严华，戴斌;人巨细胞病毒单克隆抗体的研制检定和应用[J];细胞与分子免疫学杂志;1994年03期

8 侯治富,张伟,杨绍娟,王维忠,莫秀芬;人巨细胞病毒在医院感染的监测[J];中华实验和临床病毒学杂志;1997年02期

9 王福祥,赵景波,应长青,王滨有,潘艳,郭敬佰,姜伟世,谭文华,李晓文,贾新惠,张景权;孕妇人巨细胞病毒感染危险因素的研究[J];哈尔滨医科大学学报;1997年03期

10 鲁德银,郭淑芳,邵青梅,侯炜;PCR法检测武汉地区幼儿园正常儿童尿中人巨细胞病毒DNA[J];湖北医科大学学报;1999年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 陶开华;李越希;汪兴太;李长贵;郁兴明;黄培堂;;重组人巨细胞病毒gp52蛋白的纯化及鉴定[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

2 毛春明;杨晓;张莉;孙彦洵;侯宁;吕娅歆;黄翠芬;;Smad3调节小鼠胚胎成纤维细胞的收缩能力[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年

3 李越希;陶开华;汪兴太;李长贵;周宗安;郁兴明;黄培堂;;人巨细胞病毒PP150蛋白C端多肽与gp52蛋白片段的融合表达[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C];2001年

4 何政贤;王清文;孔宪玲;陈美莲;蔡耘;杨默;;人巨细胞病毒体外感染巨核系细胞诱导凋亡的研究[A];第九届全国实验血液学会议论文摘要汇编[C];2003年

5 林孝怡;彭奕冰;季育华;;人巨细胞病毒pp65蛋白的研究进展[A];第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编[C];2004年

6 马道新;;人巨细胞病毒VP22gB联合核酸疫苗的研制及其体内免疫学活性研究[A];2005年华东六省一市血液病学学术会议暨浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2005年

7 杨劲松;郑新民;陈诗书;;PTPα基因转染小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)早期(诱导24小时)细胞生物学行为的变化[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年

8 韩凌霞;李亚明;曲连东;司昌德;姜骞;刘家森;;EIAV基因转移载体启动子的比较[A];中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集[C];2006年

9 张文军;崔凯涛;孙亮;贾雪芳;李月琴;张欣;李弘剑;周天鸿;;DNA外部引导序列EGS抑制人巨细胞病毒基因表达及病毒繁殖的研究[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年

10 叶正中;张玫瑰;陈严;冯婉玲;钟洁华;;人巨细胞病毒在人胚肺细胞内的形态发生研究[A];第六次全国电子显微学会议论文摘要集[C];1990年

中国博士学位论文全文数据库 前8条

1 朱峰;人巨细胞病毒UL49 ORF表达及产物功能的初步研究[D];暨南大学;2009年

2 王本旭;人巨细胞病毒M抗原表位的筛选与初步应用研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年

3 马艳萍;人巨细胞病毒UL141基因多态性和转录子结构分析以及人巨细胞病毒全长cDNA文库构建[D];中国医科大学;2008年

4 张文卿;HCMV pp150表达及E1-pp65慢病毒载体刺激T细胞免疫应答的研究[D];山东大学;2006年

5 王波;HCMV临床病毒株的分离及其特定基因结构分析和表达研究[D];暨南大学;2006年

6 齐莹;人巨细胞病毒UL139、UL140、UL138基因多态性研究[D];中国医科大学;2007年

7 刘志军;蛋白质组学和分子生物学在HCMV感染致病机制的应用研究[D];青岛大学;2007年

8 张亚莉;人巨细胞病毒感染ECV304细胞的病变效应及基因组表达谱研究[D];第一军医大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 姚娟;硫酸乙酰肝素介导的HCMV体外感染小鼠胚胎成纤维细胞的实验研究[D];安徽医科大学;2007年

2 黄维;体内外感染BALB/c小鼠HCMV分离株UL83、UL54基因遗传变异的研究[D];安徽医科大学;2008年

3 姜永忠;人巨细胞病毒pp65单克隆抗体的制备及其体外中和活性鉴定[D];安徽医科大学;2002年

4 常淑婷;人巨细胞病毒UL146基因-α趋化因子在巨细胞病毒感染中作用的研究[D];中国医科大学;2010年

5 张裕平;人巨细胞病毒（HCMV）PP71基因的克隆、测序及表达研究[D];中国科学院武汉病毒研究所;2001年

6 杨世炳;人巨细胞病毒pp65DNA疫苗免疫小鼠的研究[D];安徽医科大学;2004年

7 樊可;重组人巨细胞病毒基因在大肠杆菌中的表达[D];大连理工大学;2011年

8 韩俊;人巨细胞病毒cDNA表达文库的构建及pp65阳性克隆的筛选[D];安徽医科大学;2001年

9 卢颖;人巨细胞病毒UL136基因在临床低传代分离株中多态性分析[D];中国医科大学;2003年

10 李艳秋;人巨细胞病毒pp65 DNA疫苗的研制及其免疫保护作用的实验研究[D];安徽医科大学;2003年

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本文编号：1202484