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不同参数滚压模式对兔BMSCs向软骨细胞分化促进作用的研究

发布时间:2017-11-19 10:20

  本文关键词:不同参数滚压模式对兔BMSCs向软骨细胞分化促进作用的研究


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【摘要】:目的观察在不同滚压参数下,滚压载荷生物反应器对BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化的作用。方法分离2.5月龄新西兰兔BMSCs,培养至第3代后与低熔点琼脂糖复合成凝胶块,并在自制模具中形成直径4 mm、高4 mm的圆柱形BMSCs-琼脂糖复合体。将样本分别在0.4 Hz、3 h/d基本参数下比较压缩量10%、20%、30%(分别为A1、A2、A3组),以及0.4 Hz、20%压缩量基本参数下比较20 min、3 h、12 h滚压时间(分别为B1、B2、B3组)对BMSCs向软骨细胞分化的作用,以静态培养作为对照组。在培养24 h及7、14、21 d时取各组标本进行死活细胞检测、实时定量PCR检测、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量检测及组织学染色观察。结果死活细胞检测:14、21 d时,A1、A2组活细胞比率均显著高于A3组,B1、B2组活细胞比率均显著高于B3组,差异均有统计学意义(P0.05)。实时定量PCR检测:各实验组7、14、21 dⅡ型胶原及蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);14、21 d时,A1、A2组Ⅱ型胶原、Aggrecan mRNA表达均高于A3组,B1、B2组均高于B3组,差异有统计学意义(P0.05)。以上指标A1、A2组间及B1、B2组间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。GAG含量检测:14、21 d时,A1、A2组GAG含量均显著高于对照组和A3组,B1、B2组GAG含量也显著高于对照组和B3组,差异均有统计学意义(P0.05);21 d时A1、A2组间差异均有统计学意义(t=2.830,P=0.027)。组织学观察:21 d时,A2组和B2组出现明显蓝染,可见软骨陷窝样结构;而A1、A3组和B1、B3组蓝染效果较差,分布稀少。结论滚压载荷生物反应器在0.4 Hz、20%压缩量、3 h滚压时间参数下,能更有效地促进BMSCs-琼脂糖复合体中兔BMSCs向软骨细胞诱导分化。
【作者单位】: 武警后勤学院附属医院骨科;天津理工大学机械工程学院;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(11072087、11172208) 天津市自然科学基金资助项目(09JCYBJC1400)~~
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 由于关节软骨缺乏血管和神经分布,关节软骨损伤后的再生能力很弱,至今临床上未能完全修复受损的关节软骨[1]。BMSCs来源于骨髓,它具有多向分化潜能,在一定的局部力学及生化环境下可以分化为软骨细胞、成骨细胞等[2]。BMSCs同时具有易获得的特性,成为软骨组织工程研究的热点种

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本文编号:1203230

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