3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白原核表达及免疫原性差异性研究
本文关键词:3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白原核表达及免疫原性差异性研究
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【摘要】:目的研究分析3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白的免疫原性。方法利用原核表达PCR扩增了嗜吞噬细胞无形体Webster株,斯洛文尼亚1 567株,美国96HE58株ankA基因部分序列,构建pET-30a-AnkA表达载体,转化至大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导高效表达融合蛋白,经飞行质谱鉴定氨基酸序列,免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。Western blot分析3株菌AnkA重组蛋白与免疫小鼠血清抗体相互间的免疫反应以及交叉反应性。同时检测3株菌AnkA重组蛋白与我国无形体病人血清抗体反应性。结果表达的重组蛋白主要以可溶性形式存在,小鼠免疫获得高效价抗AnkA IgG抗体,3株菌重组蛋白免疫抗体间存在免疫交叉。3株菌重组蛋白与我国无形体病人血清抗体存在免疫反应。结论成功原核表达并纯化了3株嗜吞噬细胞无形体AnkA蛋白,重组蛋白与我国无形体病人阳性血清存在免疫反应。3株嗜吞噬细胞无形体AnkA重组蛋白与免疫小鼠多克隆抗体间存在交叉反应。
【作者单位】: 新疆石河子大学;中国疾病预防控制中心传染病所无形体室;
【基金】:国家973计划(No.2010CB530206) 十二五传染病重大专项课题-重大传染病应急处置检测技术平台(No.2011ZX10004-001)联合资助~~
【分类号】:R392.1
【正文快照】: Prokaryotic expression and immunogenicity of recombinantAnkA protein from 3 AnaplasmaphagocytophilumisolatesYAO Na1,2,CHEN Chuang-fu1,YU Qiang1,2,ZHANG Li-juan2(1.College of Animal ScienceTechnology,Shihezi University,Shihezi 832003,China;2.Department o
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