EDTA法纯化成年大鼠许旺细胞的实验研究

发布时间：2017-11-27 07:34

  本文关键词：EDTA法纯化成年大鼠许旺细胞的实验研究

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【摘要】：目的探讨乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸(EDTA)纯化成年大鼠许旺细胞的可行性。方法取SD成年大鼠的双侧坐骨神经,高倍显微镜下剥除神经外膜及束膜。复合胶原酶NB4消化30 min,600g离心去除上清液。加入含神经生长因子的培养液,置于细胞培养箱中预变性1周。胰蛋白酶消化预变性的神经获得原代细胞。培养至亚融合状态,EDTA-PBS溶液作用3 min,显微镜下观察许旺细胞的变化。离心去上清,加入许旺细胞培养液悬浮,种植于培养瓶,置于培养箱培养。培养至亚融合,P75免疫荧光法检测许旺细胞的纯度。结果通过两次EDTA法纯化,许旺细胞纯度已经达到99%以上。结论 EDTA可以高效纯化成年大鼠的许旺细胞。
【作者单位】： 山东医学高等专科学校内科学教研室;
【分类号】：R329.28
【正文快照】： 许旺细胞作为外周神经的胶质细胞,不仅支持、营养和保护神经轴突,在周围神经损伤修复与再生过程中也起着非常重要的作用[1-2]。构建组织工程神经导管、细胞移植治疗神经损伤及许旺细胞的分子生物学研究需要大量高纯度的许旺细胞,但是许旺细胞在体外分离培养过程中,容易混杂成

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本文编号：1231096