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携带TGF-βⅡ型受体及NKG2D融合基因的NK-92细胞生物学特性研究

发布时间:2017-12-01 10:35

  本文关键词:携带TGF-βⅡ型受体及NKG2D融合基因的NK-92细胞生物学特性研究


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【摘要】:目的构建携带TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜区及NKG2D胞内段融合基因的NK-92细胞,并检测其生物学特性。方法通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段基因;利用PCR的方法将2段基因融合,并构建含有融合基因的慢病毒穿梭质粒;将该质粒与包装质粒共转染293T细胞,获得慢病毒颗粒并感染NK-92细胞系,筛选出稳定转染的NK-92细胞系;采用流式细胞术检测目的基因在转染后的NK-92细胞系中的表达,用CCK-8的方法检测24 h和48 h时NK-92-TN的存活能力,同时用Transwell的方法检测NK-92-TN的迁移能力。结果测序表明,成功获得了TGF-βRⅡ胞外段跨膜区与NKG2D胞内段的融合基因;获得了重组慢病毒;通过筛选得到了可稳定表达融合基因的NK-92细胞系,同时NK-92-TN的存活能力和迁移能力要明显优于对照组。结论成功建立表达TN的NK-92细胞系,并且发现NK-92-TN的存活能力和迁移能力明显优于对照组,从而为NK-92-TN细胞的体内生物学功能的研究工作奠定了基础。
【作者单位】: 苏州大学生物医学研究院肿瘤与细胞分子免疫实验室;
【分类号】:R392.1
【正文快照】: 上世纪80年代相继发现了TGF-β1、TGF-β2及TGF-β3[1],到目前为止,该家族成员又增加了TGF-β4、TGF-β5。该家族成员的受体主要有TGF-βreceptorⅠ,TGF-βreceptorⅡ和TGF-βreceptorⅢ3种类型。在炎症及肿瘤发生的早期TGF-β主要抑制炎症及肿瘤的发展,但是在肿瘤发生的晚期

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本文编号:1240817


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