人骨髓间充质干细胞体外培养方法的改良

发布时间：2017-12-02 18:00

  本文关键词：人骨髓间充质干细胞体外培养方法的改良

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【摘要】：目的改良人骨髓间充质干细胞(HBMSCs)体外分离培养的方法。方法采用含体积比为10%胎牛血清的α-MEM培养体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法从人骨髓中分离培养贴壁细胞,流式检测该细胞表面标志物,体外诱导成脂、成骨、成软骨分化并鉴定该细胞的多项分化能力,集落克隆形成和MTT试验检测该细胞的活力和增殖能力,并分别与经典的Dexter长期培养体系比较。结果采用改良方法从人骨髓中分离、培养出具有塑料底物粘附性的细胞,目的细胞不表达或低表达CD14、CD34、CD45,高表达CD73、CD90、CD105;体外成功诱导脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化;Dexter-LTC体系培养的集落个数(为8.0±1.0)个、单个集落细胞数为(59.2±8.2)个,改良法培养的集落个数为(11.3±1.53)个、单个集落中细胞数为(66.5±14.4)个(P0.05);在Dexter-LTC培养体系下,BMSCs于培养d10进入对数生长期、d19进入平台期,改良法培养BMSCs d4进入对数生长期、d15进入平台期。结论成功建立了改良的HBMSCs体外分离培养体系,且该方法培养的HBMSCs体外扩增速度、增殖能力、克隆形成能力明显改善。
【作者单位】： 第三军医大学新桥医院输血科;
【基金】：国家自然科学基金(81102080)
【分类号】：R329
【正文快照】： 人骨髓间充质干细胞(human bone mesenchymalstem cells,HBMSCs)是1种具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞,在相应的诱导条件下能体外分化为骨、脂肪、软骨、神经、肝和心肌细胞等多种细胞组织[1～3],在放射病、血液病等临床治疗以及组织器官修复等方面具有极大的应用潜力

【参考文献】

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1 杨岩;陈晓;李薇;王冠军;;低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响[J];吉林大学学报(医学版);2008年01期

2 黄粤;戴丽冰;钟晓e，

本文编号：1245751