Exendin-4对人脐静脉内皮细胞内质网应激损伤的拮抗作用

发布时间：2017-12-03 15:34

  本文关键词：Exendin-4对人脐静脉内皮细胞内质网应激损伤的拮抗作用

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【摘要】：目的研究exendin-4(Ex-4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内质网应激相关凋亡的拮抗作用。方法 RPMI1640培养基培养HUVECs,待细胞长到培养瓶底部80%左右后,分4组干预细胞,每组8瓶,共32瓶。实验分组:①正常对照组(n=8):不做任何处理;②Ex-4组(n=8):(Ex-4,8μg/mL,45 min);③EPBS组(n=8):(EPBS,100μL/mL,30 min);④双药组(n=8):Ex-4预处理(8μg/mL,45 min),后加EPBS(100μL/mL,30 min)。免疫荧光法检测确认HUVECs上存在胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R);内源性过氧化氢酶抑制物(endogenous peroxidase blocking solution;EPBS)诱导HUVECs的凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;加入Ex-4预处理后,观察EPBS诱导HUVECs凋亡率的变化。Western blot检测细胞Calnexin、(C/EBP homologous protein,CHOP)和Bax表达情况,探讨内质网应激相关凋亡的机制。结果①HUVECs上有GLP-1受体表达;②与正常对照组相比,EPBS组HUVECs的凋亡率显著增加[(52.27±3.66)%vs(7.25±0.62)%,P0.01)];与EPBS组比较,Ex-4的预处理可明显降低EPBS诱导的HUVECs凋亡[(37.77±2.86)%vs(52.27±3.66)%,P0.01)]。与正常对照组相比,EPBS能增加Calnexin[(1.76±0.16)vs(1.00±0.05),P0.01]、CHOP[(4.58±0.32)vs(1.00±0.12),P0.01]和Bax[(2.25±0.10)vs(1.00±0.06),P0.01]的表达;与EPBS组比较,Ex-4的预处理可显著降低Calnexin[(0.42±0.05)vs(1.76±0.16),P0.01]、CHOP[(0.64±0.10)vs(1.65±0.12),P0.01]和Bax[(1.48±0.08)vs(2.25±0.10),P0.01)]的表达。结论 Ex-4对EPBS诱导的HUVECs凋亡有明显抑制作用,其抑制作用可能与EX-4减少内质网应激相关蛋白Calnexin、CHOP和Bax相关。
【作者单位】： 重庆医科大学附属第一医院心血管内科;
【分类号】：R363
【正文快照】： 内质网应激(ER Stress,ERS)可诱导多种细胞凋亡[1-2],内质网分子伴侣钙联蛋白(Calnexin,CLNX)在ERS的促凋亡效应中起重要作用[3-4]。C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)是一种内质网相关促凋亡蛋白,发挥转录因子的作用,参与调控生存、死亡相关基因的表达[5]。Bax是

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本文编号：1249196