胎胰蛋白促进人脂肪来源的间充质干细胞向胰岛素及C-肽阳性细胞的分化及细胞鉴定

发布时间：2017-12-04 07:04

  本文关键词：胎胰蛋白促进人脂肪来源的间充质干细胞向胰岛素及C-肽阳性细胞的分化及细胞鉴定

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【摘要】：目的:利用大鼠胚胎胰腺组织蛋白提取物诱导人脂肪来源的间充质干细胞(hASCs)向胰岛素分泌细胞分化,为临床胰岛移植寻找新的细胞来源。方法:将新生SD大鼠的胚胎胰腺匀浆后提取胎胰蛋白,重建胰腺微环境,诱导hASCs向胰腺方向分化。诱导组为胎胰蛋白培养组,对照组不添加胎胰蛋白,其余培养条件相同,诱导20d后,荧光定量PCR技术检测2组胰腺发育相关基因的表达水平,ELISA法检测细胞悬液胰岛素水平,荧光免疫组织化学检测细胞C-肽蛋白表达。结果:在胎胰蛋白诱导过程中,hASCs重要标志基因Oct3/4及Nanog的表达持续降低,说明hASCs逐渐失去全能干细胞的特性;在诱导的第6天开始检测到PDX-1和CK-19的表达上调,诱导细胞出现了胰腺方向的分化,12d开始检测到胰岛素的阳性表达。所获分化细胞基础相分泌胰岛素量为(287.17±15.67)mIU.L-1,高糖刺激下为(401.09±28.94)mIU.L-1,二者比较差异有统计学意义(P0.01),且均明显高于对照组的(4.85±1.04)mIU.L-1(P0.01);免疫荧光检测,诱导组可见C肽阳性细胞,对照组未见C-肽阳性细胞。结论:模拟的微环境可诱导hASCs分化为有功能的胰岛素产生细胞,具有替代胰岛细胞治疗糖尿病的潜在可能性。
【作者单位】： 广东省深圳市人民医院临床医学研究中心;广东省深圳市老年医学研究所;
【基金】：国家973计划前期研究专题资助课题(2007CB516811) 广东省深圳市重点科技计划项目资助课题(200901001)
【分类号】：R329
【正文快照】： Edmonton方案之后,胰岛移植成为最有希望治愈糖尿病的方法,但面临移植物来源短缺和移植排斥反应[1]。研究表明:干细胞可以表达多谱系mRNA,具有多谱系分化潜能,在特定微环境中可转分化为相应组织细胞。2001年Zuk等[2]首次从人脂肪组织中发现了大量类似于间充质干细胞(MSCs)的

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1 肖娜;程腊梅;;间充质干细胞在1型糖尿病治疗中的应用[J];国际病理科学与临床杂志;2009年03期

2 丰干钧;刘浩;;细胞移植进行椎间盘退变修复的研究进展[J];四川医学;2006年11期

3 卓本慧,李廷玉;间充质干细胞与神经细胞移植[J];国外医学.脑血管疾病分册;2002年04期

4 何秀华;李东良;;骨髓干细胞治疗肝病的研究进展[J];国际消化病杂志;2010年03期

5 赵庆华;田纪伟;;椎间盘再生基于细胞的治疗策略[J];中国矫形外科杂志;2011年05期

6 马南;钟z，

本文编号：1250134