利用亚细胞组分蛋白分离技术有效提取细胞骨架及其相关蛋白

发布时间：2017-12-08 12:14

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【摘要】：目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度。结果各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone H1和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架组分。细胞骨架蛋白组分中约90%以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白。结论亚细胞组分蛋白顺序提取方法具有较好的重复性,提取组分选择性较高,并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率,是一种比较理想的进行蛋白质组学研究的样本预处理方法。
【作者单位】： 南方医科大学南方医院检验科;香港大学李嘉诚医学院解剖系;
【基金】：国家自然科学基金(81101609) 广东省自然科学基金(9451051501003304)~~
【分类号】：R341
【正文快照】： 人类蛋白质组的概念最初由wilkins在上世纪90年代提出，是指生物体整个生命过程中基因组所表达及表达后修饰的全部蛋白质{’〕，蛋自质组学则是研究细胞内蛋白质表达模式包括表达数量、种类、丰度等和功能模式包括蛋白质的功能及蛋白质间的相互作用的学科。据估计人体中蛋白

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本文编号：1266353