尿酸诱导人脐静脉内皮细胞C反应蛋白表达的氧化应激机制研究
本文关键词:尿酸诱导人脐静脉内皮细胞C反应蛋白表达的氧化应激机制研究
【摘要】:目的研究尿酸对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)C反应蛋白(CRP)基因和蛋白表达的影响,并初步探讨其氧化应激机制。方法将不同浓度的尿酸(0、4、8、12、16mg/dL)分别与HUVECs共同孵育12h,以及将12mg/dL尿酸与HUVECs分别作用不同时间(0、6、12、24、48h)后,采用Real-time PCR检测HUVECs CRP mRNA表达;Western blot检测HUVECs CRP蛋白表达;以2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)为荧光探针,用荧光显微镜和流式细胞术检测HUVECs活性氧(ROS)水平,并观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC,10mmol/L)对HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表达的影响。结果 8~16mg/dL尿酸诱导HUVECs CRP mRNA和蛋白表达上调;12mg/dL尿酸与HUVECs作用6h,HUVECs CRP mRNA和蛋白表达明显增加(P0.05),随着时间延长,CRP mRNA和蛋白表达量逐渐增加,至12h达最高峰(P0.01)。NAC可显著抑制尿酸对HUVECs ROS水平、CRP mRNA和蛋白表达的影响,使CRP mRNA和蛋白表达接近于正常水平。结论尿酸诱导HUVECs CRP表达,其机制可能与尿酸增加HUVECs ROS水平有关,提示尿酸介导的氧化应激和炎症反应可能与内皮细胞的损伤有关。
【作者单位】: 川北医学院附属医院风湿免疫研究所;射洪县人民医院检验科;川北医学院附属医院检验科;
【分类号】:R363
【正文快照】: 系统性炎症是心血管疾病的重要决定性因素。C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)不仅是系统性炎症的敏感生化标志物,且通过使内皮功能失调和平滑肌细胞增殖等多种途径和机制导致动脉粥样硬化(AS)的发生和发展,被认为是心血管事件最强有力的预测因子之一[1]。尽管肝细胞是合成
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