血清和无血清诱导方法分化小鼠胚胎干细胞为定形内胚层的比较

发布时间：2017-12-14 16:20

  本文关键词：血清和无血清诱导方法分化小鼠胚胎干细胞为定形内胚层的比较

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【摘要】：目的比较两种方法(血清诱导方法和无血清诱导方法)诱导小鼠胚胎干细胞分化为定形内胚层细胞的效率。方法利用血清诱导法和无血清诱导法分别诱导分化小鼠胚胎干细胞,根据定形内胚层表面标记蛋白(Cxcr4、c-Kit和E-cadherin)的表达,通过流式细胞术分析定形内胚层诱导的时间及效率,并利用RT-PCR检测两种方法诱导的定形内胚层基因表达谱;同时利用荧光定量PCR检测无血清诱导过程中内胚层基因的表达情况;利用流式细胞术分选Cxcr4和c-Kit双阳性细胞进行定形内胚层基因表达的鉴定。结果血清诱导法和无血清诱导法都能够将胚胎干细胞诱导分化为定形内胚层,其中无血清组的诱导效率高于血清组,高达74.19%,并且在诱导的第4天就能到达峰值。结论建立了高效快捷的诱导胚胎干细胞分化为定形内胚层细胞的方法,为进一步向肝、胰等组织细胞诱导打下了基础。
【作者单位】： 北京市神经外科研究所;北京医院普通外科;中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所;第二军医大学基础部细胞生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金(30671044/C07)~~
【分类号】：R321
【正文快照】： 胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES)来源于哺乳动物囊胚内细胞团,在合适的诱导条件下,可以定向分化为外胚层、中胚层、定形内胚层(definitiveendoderm,DE)来源的功能性细胞。由于多潜能分化特性和体外自我更新的增殖能力[1],ES成为组织工程及细胞治疗的“种子细胞”首选来

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