志贺菌诱导耐多药相关基因抑制性消减杂交法筛选

发布时间：2017-12-16 07:06

  本文关键词：志贺菌诱导耐多药相关基因抑制性消减杂交法筛选

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【摘要】：目的应用抑制性消减杂交技术研究志贺菌诱导耐多药株与其敏感株之间差异基因,筛选耐多药相关基因,探讨基因表达差异与志贺菌诱导耐多药的相关性。方法以志贺菌诱导耐多药株DNA为检测子(tester),以其敏感株DNA为驱赶子(driver),构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中做同源性比较分析。结果成功构建了志贺菌诱导耐多药株的特异性DNA消减杂交文库;选取部分阳性克隆进行杂交筛选,获得12个诱导耐多药差异片段,对其中6个基因片段经克隆测序并与GenBank数据库进行初步比对,3个未知基因可能为新基因,3个已知基因分别为16S rRNA核糖体基因、预测的rep蛋白质(解螺旋酶)、位点特异性Ⅰ型脱氧核糖核酸酶(Hsds)等相关基因。结论志贺菌耐多药是多基因参与的复杂过程,筛选的新基因片段为进一步克隆其全长基因进而研究其功能打下基础。
【作者单位】： 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室;河南科技大学医学院预防医学教研室;
【基金】：河南省医学科技公关项目(WKJ2007-2-024)
【分类号】：R378.2
【正文快照】： 近年来,随着抗生素广泛使用甚至滥用,造成志贺菌菌株频繁发生变异,产生耐药株,且耐药率高、耐药产生速度快及范围广[1-2],给细菌性痢疾的防治带来新的挑战。因此,深入探讨志贺菌耐多药机制成为目前解决志贺菌耐多药的先决条件。本研究于2011年6月,采用差异表达基因克隆技术抑

【参考文献】

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【共引文献】

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【相似文献】

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2 齐，

本文编号：1295109