普氏立克次体重组表面蛋白制备和免疫印迹抗原特异性分析

发布时间：2017-12-17 15:22

  本文关键词：普氏立克次体重组表面蛋白制备和免疫印迹抗原特异性分析

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【摘要】：目的克隆与表达普氏立克次体(Rickettesia prowazekii)主要蛋白抗原基因,分析所表达重组蛋白的抗原特异性。方法采用PCR法从普氏立克次体全基因组中扩增其主要抗原基因,将扩得的基因片段插入原核表达质粒;将基因重组表达质粒转化大肠杆菌,用IPTG诱导转化菌表达重组蛋白。将普氏立克次体、莫氏立克次体、立氏立克次体、恙虫病东方体、黑龙江立克次体、贝氏柯克斯体等实验感染小鼠血清与重组蛋白做免疫印迹。结果经过PCR扩增后获得9个目的基因片段,用其构建出9个原核表达质粒;9个原核表达质粒转化菌均高效表达出相应的重组蛋白;结果显示FtsZ、GroEL、Rp828、EF-Ts等4个蛋白特异性最好,仅与普氏立克次体感染小鼠血清反应;其次是Omp,它除与普氏立克次体感染小鼠血清反应外,仅与莫氏立克次体感染血清反应。结论 FtsZ等4个重组蛋白为普氏立克次体的特异性抗原,可以作为研制流行性斑疹伤寒血清学诊断试剂的候选抗原。
【作者单位】： 中南大学基础医学院微生物学系;军事医学科学院微生物流行病研究所病 原生物生物安全国家重点实验室;军事医学科学院微生物流行病研究所病原 生物生物安全国家重点实验室;
【基金】：国家基础研究计划(973计划课题2010CB530200/2010CB530205)资助~~
【分类号】：R376
【正文快照】： 普氏立克次体(Rickettsia prowazekii)是流行性斑疹伤寒的病原体,普氏立克次体引起的疾病称为流行性斑疹伤寒(epidemic typhus)。流行性斑疹伤寒是一种急性传染病,其临床主要特征为起病急、 持续高热和瘀点样皮疹,常伴有剧烈头痛、背痛,严重病人多有中枢神经系统损伤症状。

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本文编号：1300616