D-半乳糖对大鼠骨髓间充质干细胞衰老的影响

发布时间：2017-12-18 18:08

  本文关键词：D-半乳糖对大鼠骨髓间充质干细胞衰老的影响

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【摘要】：目的:观察D-半乳糖(D-galactose,D-gal)对骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)衰老的影响,构建体外MSCs衰老诱导模型。方法:分离SD大鼠(7日龄)MSCs,传代培养至第3代后,细胞随机分为4组:分别为正常对照组,1 g/L,10 g/L和50 g/L D-gal衰老诱导组。对照组在正常的DMEM培养液中继续培养;诱导组MSCs分别在含1 g/L、10 g/L、50 g/L D-gal的DMEM培养液中培养48 h。各组细胞培养结束后,衰老相关β-半乳糖苷酶染色法观察细胞衰老变化、Western blot法检测衰老相关蛋白p53、p21和p16表达,AO/EB双染法检测细胞凋亡,MTT法检测细胞增殖,超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量检测细胞内氧化应激水平。结果:10 g/L和50 g/L D-gal诱导组衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数较对照组显著升高(P0.01),衰老相关蛋白p53、p21和p16表达明显增高:AO/EB染色结果显示50 g/L D-gal诱导组细胞凋亡率较对照组显著升高(P0.01);MTT检测结果表明10 g/L和50 g/L D-gal均能抑制MSCs增殖活性,而10 g/L和50 g/L D-gal诱导组MSCs内SOD活力较对照组明显降低(P0.01),MDA含量显著升高(P0.01)。结论:10 g/L和50 g/L D-gal均可诱导MSCs发生衰老变化,并促使细胞内衰老相关蛋白p53、p21和p16表达增加,细胞存活能力减弱,增殖能力降低,这可能与D-gal促使MSCs内氧化应激水平升高有关。10 g/L是D-gal诱导MSCs衰老的合适浓度。
【作者单位】： 浙江大学城市学院医学院;杭州市第二人民医院;
【基金】：杭州市科技发展计划基金资助项目(20110833B11) 浙江大学城市学院大学生科研资助项目(X2013562118)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 干细胞具有自我更新及多向分化能力,对机体稳态的维持和器官损伤的修复具有重要作用[1]。但干细胞和体内其他细胞一样,也会衰老,衰老干细胞增殖及分化能力减弱[2-3]。MSCs(mesenchymal stem cells,MSCs)可分化为中胚层的各种细胞且经诱导能向神经外胚层分化,是临床细胞移植重

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本文编号：1305105