微型核酶对贾第虫组织蛋白酶B基因体外转录体切割效果的研究

发布时间：2017-12-19 19:24

  本文关键词：微型核酶对贾第虫组织蛋白酶B基因体外转录体切割效果的研究　出处：《中国病原生物学杂志》2013年04期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的检测微型核酶对篮氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)组织蛋白酶B基因体外转录体的切割效率。方法用RNA draw软件对贾第虫组织蛋白酶B基因序列二级结构进行模拟分析,并按照微型核酶设计的原则,选取合适的核酶切割位点,设计微型核酶序列,构建含贾第虫组织蛋白酶B基因短反义序列和长反义序列的两个微型核酶嵌合型犬贾第虫病毒重组质粒(CRzS和CRzL),以三磷酸甘油醛脱氢酶基因的微型核酶(GRzL)和无核酶的组织蛋白酶B基因(PCB)重组质粒作对照。将重组质粒线性化后体外转录为mRNA,然后用微型核酶体外切割组织蛋白酶B基因转录体,采用实时荧光定量PCR检测切割效率。结果微型核酶CRzS和CRzL对组织蛋白酶B基因转录体切割效率分别为75.42%和83.14%,微型核酶GRzL的切割效率为0.02%,无核酶PCB切割效率为23.0%。结论微型核酶可有效切割贾第虫组织蛋白酶B基因转录体,为开展体内抑制组织蛋白酶B基因表达试验奠定了基础。
【作者单位】： 吉林大学畜牧兽医学院;
【基金】：国家自然科学基金青年科学基金项目(No.31101804)
【分类号】：R382
【正文快照】： 蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)感染引起人兽共患贾第虫病,该病呈世界性分布。贾第虫主要寄生于包括人在内的哺乳动物、鸟类以及两栖类等动物[1]。近年来,贾第虫被认为是一种机会致病性原虫,在艾滋病患者中常有贾第虫合并感染[2,3]。贾第虫病毒为专性寄生在贾第虫体内的病毒[4],

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本文编号：1309156