微流控电融合芯片的研制及其在体细胞重编程中的应用

发布时间：2017-12-22 16:02

  本文关键词：微流控电融合芯片的研制及其在体细胞重编程中的应用　出处：《第三军医大学学报》2013年01期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的开发高通量的细胞电融合平台,并通过此平台将小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)与体细胞融合,探讨融合细胞的多能性。方法本实验室自主研发微流控芯片,将转染了绿色荧光的mESCs与转染了红色荧光的NIH3T3细胞进行电融合,并计算其排队率与融合率。通过流式细胞仪筛选出表达两种荧光的融合细胞,观察融合细胞的表型。RT-PCR检测NIH3T3、mESC以及融合细胞的多能性基因(Nanog、OCT4、SOX2和LIN28)mRNA的表达水平。结果自主研发了微流控芯片,构建了高通量的细胞电融合平台,通过此平台将mESCs与NIH3T3进行电融合,其排队率为(44.35±10.99)%,融合率为(59.88±20.03)%,融合细胞可形成类似于ESC样的克隆。RT-PCR法结果显示mESC和融合细胞均表达多能性基因Nanog、OCT4、SOX2和LIN28 mRNA,而NIH3T3不表达。结论通过自主研发的微流控芯片,可实现mESCs与NIH3T3的高效融合,使体细胞重编程为多能性干细胞。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院全军眼科中心;视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室;重庆大学生物工程学院;
【基金】：重庆市留学回国人员启动基金(CSTC2011jjzt0137) 国家自然科学基金(31071299)~~
【分类号】：R346
【正文快照】： 已分化的体细胞可以通过重编程来改变其命运,在一定条件下可以转化为其他类型的细胞,甚至回到多能状态。而由患者自身体细胞重编程而来的诱导性多能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC),可作为细胞移植的种子细胞使用,避免了使用胚胎干细胞所面临的伦理学障碍,并

【参考文献】

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3 屈娅;徐海伟;阴正勤;;电融合技术进展及其在干细胞研究中的应用[J];中国生物工程杂志;2010年07期

【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1320075