人脂联素基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建

发布时间：2017-12-25 17:13

  本文关键词：人脂联素基因启动子荧光素酶报告基因载体的构建　出处：《世界科学技术-中医药现代化》2013年01期 　论文类型：期刊论文

  更多相关文章： 脂联素基因 启动子 克隆 人基因组DNA 荧光素酶报告基因

【摘要】：目的:克隆不同长度人脂联素基因(AD)启动子片段,构建含人AD启动子片段的荧光素酶报告基因载体并进行测序鉴定。方法:利用PCR技术从人全血基因组DNA中扩增出AD启动子片段,经纯化酶切后克隆入载体pGL-3 basic中,形成重组质粒,筛选阳性克隆进行测序,并与GenBank比对。结果:从人全血基因组DNA中PCR扩增得到1.1 kb和2.1 kb AD启动子片段,构建2种报告基因载体,将其命名为AD promoter1.1-pGL-3 basic和AD promoter2.1-pGL-3 basic,经测序证实所插入的目的片段与GenBank检索的人AD启动子序列99.6%匹配。结论:成功构建了含人AD启动子片段的报告基因载体。
【作者单位】： 河南中医学院第一附属医院;河南中医学院第一临床医学院;河南中医学院第一附属医院/河南省病毒性疾病中医药防治重点实验室;
【基金】：郑州市科技公关计划项目(0910SGYS33391-1):以脂肪细胞分泌因子为靶点的减肥中药初步筛选,负责人:宰军华
【分类号】：R346
【正文快照】： 近年来实验研究表明,脂肪组织是一个代谢活跃、功能复杂的内分泌器官,可以产生多种具有生物活性的物质,如脂联素(Adiponectin,AD)、瘦素(Leptin)、纤溶酶原激活物抑制因子(Plasminogen ac-tivator inhibitor 1,PAI-1)、抵抗素(Resistin)、白介素6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 孙大康;安新业;郑静;胡凤爱;李彩玉;;Trim5α对TAB2诱导的NFκB启动子荧光素酶报告基因活性的影响[J];免疫学杂志;2011年07期

2 石长信,刘扬,温乐英,周伟,屈建国,王健伟,洪涛;7型腺病毒疫苗株DNA左侧17.5mu片段克隆及4.8mu片段核苷酸序列分析[J];中华实验和临床病毒学杂志;1999年02期

3 张毅,滕家波,叶棋浓,刘及,苏国富,张翔;人单核细胞趋化蛋白—1融合表达质粒的构建[J];白求恩医科大学学报;1999年02期

4 王颖群,吴佐泉,丁继兵,史贤明;中国人胶质细胞源神经营养因子基因的克隆及测序[J];中国临床神经外科杂志;2001年02期

5 蒙雅萍;李倪;;人乳头瘤病毒E5的研究进展[J];中国妇幼健康研究;2006年03期

6 郭雄明;吴东;;黄病毒属病毒感染性克隆的构建及应用[J];军医进修学院学报;2007年01期

7 牛立峰;刘钦毅;王景宏;赵红光;;大鼠胶质细胞源性神经营养因子真核表达载体的构建[J];中国医学工程;2009年03期

8 高静;申林;明树红;;人TSLC1基因核心启动子的克隆和鉴定[J];基础医学与临床;2010年04期

9 柴晓杰;王晓庆;张婷;代靖宇;;轮状病毒VP7基因的克隆与表达[J];生物技术通报;2011年03期

10 唐向辉;;体外制备RNA探针——一种极有希望的从质粒DNA合成单链RNA新技术[J];医学分子生物学杂志;1986年03期

相关会议论文 前10条

1 王秀亮;陈卫;梁光萍;陈建;苏踊跃;杨陈;罗向东;;人β1整合素远端启动子542bp报告基因载体构建和鉴定及启动活性分析[A];第六届全国烧伤救治专题研讨会论文汇编[C];2009年

2 刘伟;朱兴全;戴荣四;林瑞庆;宋慧群;程天印;刘毅;;湖南省日本血吸虫线粒体nad4基因的多态性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年

3 刘伟;朱兴全;戴荣四;林瑞庆;宋慧群;程天印;刘毅;;湖南省日本血吸虫线粒体cox1基因的多态性研究[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年

4 王松泰;张继瑜;魏小娟;曹小安;邱昌庆;;福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年

5 于维麟;朱元祺;;金黄色葡萄球菌肠毒素B的基因克隆及原核表达[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

6 朱红梅;娄永华;贾yN鹏;温海;;新生隐球菌STE12α基因的克隆及表达载体的构建[A];2009全国中西医结合皮肤性病学术会议论文汇编[C];2009年

7 谢辉;王雅静;帖超男;刘佩娜;;阴道毛滴虫铁氧化还原蛋白基因的克隆和序列分析[A];四川省动物学会第八次会员代表大会暨第九次学术年会论文集[C];2004年

8 张宜乾;张中明;闫英群;董红燕;;氧相关HRE启动子控制下表达hVEGF165基因重组2型腺相关病毒的获得及鉴定[A];第八届华东六省一市胸心血管外科学术会议论文汇编[C];2005年

9 闫国和;粟永萍;王军平;艾国平;王锋超;郑怀恩;程天民;;重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染[A];第六届全国生物医学体视学学术会议暨第九届全军军事病理学学术会议、第五届全军定量病理学学术会议论文汇编[C];2005年

10 王永久;由振东;崔瑞耀;路长林;何成;;大鼠脑中催产素受体cDNA的克隆和在大肠杆菌与CHO细胞内的表达[A];全面建设小康社会：中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集（下）[C];2003年

相关重要报纸文章 前10条

1 陈勇;专家有突破　借助基因杀死癌细胞[N];人民日报;2005年

2 记者 何德功;抗癌病毒可以破坏癌细胞[N];新华每日电讯;2002年

3 记者 陈勇;基因疗法治癌，，美攻克关键障碍[N];新华每日电讯;2005年

4 ;金风送爽满篮丰[N];中国医药报;2005年

5 记者白毅;建立重组人胸腺肽α1高效表达平台[N];中国医药报;2005年

6 ;日本研究出消灭癌细胞的病毒[N];中国高新技术产业导报;2002年

7 张中桥;可诱导性真核表达载体构建成功[N];中国医药报;2004年

8 首都师范大学教育科学学院心理学博士 上官芳芳;天赋基因检测 荒唐的神话[N];健康报;2010年

9 ;汉族人群RANTES基因多态性与艾滋病病毒－1感染关系的初步研究[N];中国医药报;2003年

10 郑焕斌;美国获得极具致命性鼠痘病毒[N];科技日报;2003年

相关博士学位论文 前10条

1 祝秉东;人β-防御素-1基因表达与转录调控[D];四川大学;2004年

2 周晓红;弓形虫MAG和tSAG1在转基因番茄中的表达研究[D];第一军医大学;2004年

3 菅金龙;CD226基因表达调控的研究[D];第四军医大学;2005年

4 孙海晶;p300/HDAC介导的可逆的乙酰化修饰参与Th1细胞因子IL-12和IL-18基因转录水平的调控[D];东北师范大学;2004年

5 宁铂涛;鼠抗人CD14新克隆ZCH-7-2F9单链抗体的研究[D];浙江大学;2005年

6 卞继峰;新型双启动子DNA疫苗载体的研制及在人乳头瘤病毒疫苗研究中的应用[D];山东大学;2003年

7 康巧珍;幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因克隆表达及免疫评价[D];郑州大学;2005年

8 柴玉荣;杜氏盐藻的RbcS基因及其调控区的克隆和功能鉴定[D];郑州大学;2005年

9 吕萍;小鼠Lrp5基因表达调控的研究[D];山东大学;2005年

10 赵志宇;新生隐球菌荚膜相关基因CAP10调控机制研究[D];第二军医大学;2005年

相关硕士学位论文 前10条

1 李婉南;人SHP-1催化结构域的克隆表达及其多克隆抗体的制备[D];吉林大学;2005年

2 吴滨;人酰基辅酶A：胆固醇酰基转移酶-1基因P1启动子的TNF-α效应元件分析鉴定[D];华东师范大学;2004年

3 张勇;人ALEX2基因的克隆、表达与纯化及生物信息学分析[D];第四军医大学;2005年

4 汪猜;人巨细胞病毒（HCMV）pp65基因的克隆、原核表达及抗原性研究[D];湖南农业大学;2005年

5 闫峻;乌苏里蝮蛇具抑制血小板聚集活性的金属蛋白酶分离纯化及基因信息学分析[D];吉林大学;2005年

6 代芳;人过氧化物酶体增殖体激活受体γ2基因克隆及其稳定表达株的鉴定[D];安徽医科大学;2005年

7 黄家芳;日本血吸虫Dna J-类似蛋白基因原核、真核表达载体的构建及其对小鼠的保护性免疫作用研究[D];南华大学;2005年

8 汪雪峰;球形幽门螺杆菌vacA、cagA基因克隆及序列分析[D];安徽理工大学;2005年

9 赵宏伟;DNase B基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[D];福建师范大学;2005年

10 赵志军;A型产气荚膜梭菌α-毒素基因的克隆、高效表达及其免疫原性研究[D];宁夏大学;2005年

本文编号：1333712