用于膜片钳研究的乳鼠窦房结细胞的分离与鉴定
本文关键词：用于膜片钳研究的乳鼠窦房结细胞的分离与鉴定 出处：《南方医科大学学报》2013年03期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的比较"酶解+差速贴壁"法和"酶解+差速贴壁+5-溴脱氧尿嘧啶核苷(常规培养)"法体外分离培养乳鼠窦房结细胞,寻找可行的用于膜片钳实验的分离方法。方法取Wistar乳鼠的窦房结组织,分别采用"酶解+差速贴壁"和常规培养法分离培养窦房结细胞,观察细胞形态结构、搏动频率、膜片钳实验难易程度及成功率。同样方法分离培养心房肌细胞作为对照。结果培养的窦房结细胞中梭形细胞最多、心房肌细胞中三角形细胞最多。两种方法分离的窦房结细胞中均为梭形细胞最多并均可记录到自发性动作电位,其中"酶解+差速贴壁"法分离的细胞活性更好,进行膜片钳实验的成功率更高。结论"酶解+差速贴壁"法能成功分离出乳鼠窦房结细胞,操作步骤简单,细胞损伤小、活性好,能更好地进行膜片钳实验研究。
[Abstract]:Objective to compare the isolation and culture of sinoatrial node cells from neonatal rats by "differential adherence" method and "5-bromodeoxyuridine (conventional culture) method" in vitro. Methods sinoatrial node cells were isolated from the sinoatrial node of Wistar suckling rats and cultured by "differential adherence" and conventional culture method. The morphology, pulsatile frequency, the degree of difficulty and success rate of patch clamp test were observed. The same method was used to isolate and culture atrial myocytes as control. Results the fusiform cells were the most in sinoatrial node cells. Triangular cells were the most in atrial myocytes. The number of spindle cells in sinoatrial node cells separated by both methods was the most and spontaneous action potentials were recorded. The cell activity was better and the success rate of patch clamp experiment was higher. Conclusion the method of "differential adherence by enzyme hydrolysis" can successfully isolate sinoatrial node cells from neonatal rats, and the procedure is simple. The cell damage is small, the activity is good, and the patch clamp experiment can be carried out better.
【作者单位】： 中国中医科学院广安门医院心内科;解放军总医院老年心血管病研究所;
【基金】：北京市自然科学基金(7102135)
【分类号】：R363
【正文快照】： 窦房结是心脏的正常起搏点,窦房结起搏细胞的自发性搏动调控心脏的正常生理活动,细胞膜上各种离子通道的复杂活动是窦房结电生理机制的基础[1-3],目前多处于组织细胞及分子生物学相关研究水平[4-6]。利用膜片钳技术进行离子通道学研究是个里程碑式的发展[7],窦房结细胞离子通
【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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，本文编号：1359444
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