铜绿假单胞菌pfm基因对三型分泌系统效应蛋白的影响

发布时间：2018-01-05 17:08

  本文关键词：铜绿假单胞菌pfm基因对三型分泌系统效应蛋白的影响　出处：《微生物学通报》2013年08期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：【目的】检测铜绿假单胞菌基因pfm对三型分泌系统效应蛋白的影响。【方法】构建pfm基因互补菌株pfmC。提取野生株PAO1、敲除株Δpfm和互补株pfmC的RNA,利用Real-time PCR从转录水平检测效应蛋白ExoS、ExoT和ExoY转录水平的变化。以ExoS为代表,检测细胞内和分泌到细胞外效应蛋白的含量。收集铜绿假单胞菌PAO1、Δpfm和pfmC菌体内和分泌到细胞外的总蛋白,利用ExoS多克隆抗体进行Western杂交,特异检测ExoS的蛋白水平。【结果】与野生型相比,Δpfm中exoS、exoT和exoY转录水平明显降低,而pfmC中这3个蛋白的转录水平得到回补。Δpfm菌体内和分泌到细胞外的ExoS量均明显低于野生株PAO1,pfmC细胞内和细胞外分泌的ExoS蛋白量均得到恢复。【结论】铜绿假单胞菌基因pfm会影响三型分泌系统效应蛋白的水平。
[Abstract]:[objective] to detect the effect of Pseudomonas aeruginosa gene pfm on secretory system effector protein. [methods] to construct pfm gene complementary strain pfmC. extract wild strain PAO1. The RNAs of the knockout strain 螖 pfm and the complementary strain pfmC were removed and the effector protein ExoS was detected at the transcriptional level by Real-time PCR. Changes of ExoT and ExoY transcriptional levels. ExoS was used as the representative to detect intracellular and extracellular effector proteins. PAO1 was collected from Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa). The total proteins secreted into cells by 螖 pfm and pfmC were hybridized by Western using ExoS polyclonal antibodies. The protein level of ExoS was detected specifically. [results] compared with wild type, the transcriptional levels of exoSnexoT and exoY in 螖 pfm were significantly lower than those in wild type. The transcriptional levels of these three proteins in pfmC were compensated. The amount of ExoS secreted into the cells of 螖 pfm was significantly lower than that of the wild strain PAO1. Both intracellular and extracellular secretion of ExoS protein in pfmC cells recovered. [conclusion] Pseudomonas aeruginosa gene pfm may affect the level of secretory system effector protein of type 3.
【作者单位】： 南开大学生命科学学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(No.30570089) 天津市应用基础研究计划项目(No.07JCYBJC08000)
【分类号】：R378
【正文快照】： 铜绿假单胞菌属于革兰氏阴性细菌,是医院三大致病菌之一。该菌通过一系列毒力机制介导感染,三型分泌系统是其中一种重要的机制。细菌三型分泌系统在细胞表面形成针状结构,可以直接将毒力蛋白注入宿主细胞,造成宿主细胞死亡,与细菌快速感染直接相关[1]。铜绿假单胞菌三型分泌

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1384033