幽门螺杆菌尿素酶B亚单位优势Th表位的系统筛选与鉴定
本文关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位优势Th表位的系统筛选与鉴定 出处：《第三军医大学学报》2013年03期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的筛选幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(UreB)中CD4+细胞优势应答表位,并确定其MHC限制性。方法以重组UreB蛋白(rUreB)与弗氏佐剂联合皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,从小鼠脾脏中体外扩增UreB特异性T淋巴细胞,采用步移重叠合成肽法筛选CD4+T细胞优势应答表位,分析其MHC分子限制性。结果 18mer短肽筛选发现UreB403-420和UreB409-426可显著刺激UreB特异性CD4+T细胞产生IFN-γ。13mer短肽鉴定实验结果显示,UreB409-421可刺激产生与18mer短肽UreB403-420和UreB409-426等同的应答强度。同时抗体阻断实验表明,抗H-2d(I-A)单克隆抗体能有效阻断该表位的应答。结论 UreB403-420和UreB409-426为UreB抗原中的优势Th表位,其刺激免疫反应的核心位置为UreB409-421,且存在H-2d(I-A)限制性。
[Abstract]:Objective to screen the dominant response epitopes of CD4 cells in Helicobacter pylori Helicobacter pylori (Helicobacter pylori) urease B subunit (UreB). Methods BALB/c mice were immunized with recombinant UreB protein rUreB and Freund's adjuvant. UreB specific T lymphocytes were amplified from mouse spleen in vitro and the dominant response epitopes of CD4 T cells were screened by step overlapping synthetic peptide method. Results 18mer short peptide screening showed that UreB403-420 and UreB409-426 could significantly stimulate UreB specific CD4. T cells produced IFN- 纬 .13mer short peptide. UreB409-421 stimulated the production of the same response intensity as 18mer short peptide UreB403-420 and UreB409-426. Anti-H-2dnI-A) monoclonal antibody can effectively block the response of the epitope. Conclusion UreB403-420 and UreB409-426 are the dominant Th epitopes in UreB antigen. UreB 409-421 was the core of its stimulating immune response, and it was restricted by H-2 D I-A.
【作者单位】： 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室国家免疫生物制品工程技术研究中心;第三军医大学新桥医院消化内科;
【基金】：国家自然科学基金(81072493) 重庆市自然科学基金(CSTC2011BB5043)~~
【分类号】：R377
【正文快照】： 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)定植于人胃黏膜,致全球50%以上的人群感染,成为慢性胃炎、胃十二指肠溃疡及胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等胃肠疾病的主要致病因素[1-2]。目前临床疗法存在多种不足[3],而表位疫苗的免疫接种有可能成为彻底消除Hp感染和治疗相关胃肠疾病的有
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