应用纤连蛋白片段建立椎间盘退变动物模型

发布时间：2018-01-13 03:16

  本文关键词：应用纤连蛋白片段建立椎间盘退变动物模型　出处：《中国脊柱脊髓杂志》2013年01期 　论文类型：期刊论文

  更多相关文章： 椎间盘退变 动物模型 纤连蛋白片段 大白兔

【摘要】：目的:探讨应用N端30kDa纤连蛋白片段(Fn-f)建立模拟人类椎间盘退变规律的椎间盘退变动物模型的可行性,为椎间盘退变的防治提供实验模型及实验依据。方法:选取雄性6月龄新西兰大白兔28只,麻醉后使用30G微量注射针和微量注射器,在透视引导下经皮将25μl 1.5μmol/L Fn-f(Fn-f组)或25μl磷酸缓冲液(PBS,0.01mol/L,pH值7.2;PBS组)随机分别注射入不同节段的腰椎间盘中心区。分别于注射4、8、12、16周后获取椎间盘,对椎间盘进行组织学检测(HE、Masson三色及番红O染色),并以RT-PCR法对椎间盘聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的基因表达水平进行分析。结果:与注射PBS椎间盘相比,注射Fn-f椎间盘造模后4周时椎间盘的髓核、纤维环结构以及胞外基质蛋白聚糖等无明显差别;8周时髓核细胞数量减少、细胞簇状分布,被胞外基质分隔开来,纤维环层状结构排列部分出现紊乱,蛋白聚糖染色变浅;12和16周时髓核细胞数量明显减少,细胞变圆,呈明显的成簇聚集分布,纤维环排列明显不规整,各层间出现裂隙,甚至断裂,蛋白聚糖染色明显变浅,甚至部分未见染色。Fn-f组椎间盘聚集蛋白聚糖mRNA表达水平在8、12和16周3个时间点均明显低于PBS组(P0.05);Ⅱ型胶原mRNA表达水平在12和16周时明显低于PBS对照组(P0.05)。结论:透视引导下兔椎间盘内注射N端30kDa Fn-f可诱导椎间盘产生渐进性退行性病变,该法建立的动物模型可作为研究椎间盘退变的发病机制及防治的实验模板。
[Abstract]:Objective: to investigate the feasibility of using N-terminal 30kDa fibronectin fragment (Fn-f) to establish an animal model of intervertebral disc degeneration. Methods: 28 male 6 months old New Zealand white rabbits were selected and 30 G microinjection needle and micro syringe were used after anesthesia. The pH value of 25 渭 l 1.5 渭 mol/L Fn-f(Fn-f group or 25 渭 l phosphoric acid buffer solution was 0.01 mol / L 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1). PBS group was randomly injected into the central region of different segments of lumbar intervertebral disc. The intervertebral disc was obtained 16 weeks after injection of 4 pieces 812m, and the histopathological examination of the intervertebral disc was performed. The gene expression levels of proteoglycan and type 鈪，

本文编号：1417222