地塞米松对弓形虫RH株增殖及宿主与弓形虫多不饱和脂肪酸代谢的影响

发布时间：2018-01-19 20:01

本文关键词： 刚地弓形虫地塞米松多不饱和脂肪酸增殖　出处：《重庆医科大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究背景及目的:刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种顶复门专性细胞内寄生虫,可以导致人等哺乳类动物,甚至鸟类感染,引起弓形虫病。大部分人在感染弓形虫后通常处于无症状的隐性感染阶段,一旦机体免疫力受损,体内休眠期的弓形虫将快速增殖引起严重的弓形虫病,尤其是在患有艾滋病,使用免疫抑制剂后或器官移植病人中更加严重。临床上,患者长期应用皮质醇激素极易引发急性弓形虫病,研究表明外源性糖皮质激素增加会增强动物对多种病原体易感性。地塞米松作为一种糖皮质激素在临床上广泛应用,它不仅具有抗炎、抗休克等作用,同时还会影响脂肪酸代谢。有研究表明地塞米松对大鼠巨噬细胞中的弓形虫有一定增殖作用,但其作用机制不清楚。多不饱和脂肪酸不光是生物体细胞膜的重要组成部分,同时还参与细胞代谢信号传导过程,本文研究多不饱和脂肪酸代谢在地塞米松对弓形虫RH株增殖中的作用。方法:1.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测地塞米松对弓形虫增殖作用.2.吉氏染色观察细胞内弓形虫增殖率,侵袭率.3.细胞计数法计数地塞米松对弓形虫的增殖作用.4.气相色谱分析地塞米松对弓形虫RH株,人乳腺癌231细胞多不饱和脂肪酸代谢的影响.结果:1.MTT法检测显示地塞米松能促进弓形虫增殖并呈浓度依赖性。地塞米松作用弓形虫后,24h时实验组和对照组相比差异不明显。但地塞米松作用弓形虫48h后增殖作用明显,10~(-7),10~(-6),10~(-5),10~(-4)mg/ml不同浓度地塞米松作用72h后实验组OD值分别为0.4570±0.017,0.5545±0.023,0.6024±0.035,0.6535±0.046,而对照组为0.3505±0.012,实验组OD值高于对照组,差异有统计学意义(P0.001)。2.10~(-4)mg/ml地塞米松作用弓形虫不同时间后,吉氏染色,1000倍显微镜下观察,处理组细胞内假包囊体积明显大于对照组。计数实验组地塞米松作用24h,48h,60h,72h后每100个231细胞中有65±1,88±2,99±1,100±0个细胞感染弓形虫,而对照组为51±3,68±2,83±2,92.3±2。实验组感染率明显高于对照组,差异均有有统计学意义(P0.001)。计数地塞米松实验组48h,60h,72h后100个细胞内弓形虫数量分别为497±5,1071±21,4847±115高于对照组(269±7,573±11,1057±42),差异有统计学意义(P0.001)。3.细胞计数法显示,10-4mg/ml DXM作用48h后对照组和实验组之间细胞外弓形虫数量有明显差异(p0.01).10~(-4)mg/ml DXM作用48h,72h,96h后细胞外弓形虫数量分别为(18±5,119±16,154±29)×10~4个/ml,而对照组为(17±5,65±10,69±10)×10~4个/ml。4.气相色谱分析发现弓形虫脂肪酸多为长链不饱和脂肪酸,主要有以下几种组成:c16:0、c18:0、c18:1、c18:2、c18:3、c20:0、c20:1、c20:2、c20:4、c22:1、c22:2,其中大部分为多不饱和脂肪酸。气相色谱分析发现实验组弓形虫和231细胞c18:1油酸含量明显升高;感染弓形虫的231细胞多不饱和脂肪酸含量明显高于未感染弓形虫的231细胞,而地塞米松作用后感染弓形虫的231细胞多不饱和脂肪酸量与未感染弓形虫的231细胞相近。结论:1.地塞米松对弓形虫有明显的增殖作用,呈浓度依赖型。2.地塞米松能影响弓形虫和人乳腺癌231细胞膜多不饱和脂肪酸代谢。3.地塞米松促进弓形虫增殖作用的机制可能是通过改变宿主细胞和弓形虫多不饱和脂肪酸代谢来实现。
[Abstract]:The effects of dexamethasone on the proliferation of Toxoplasma gondii RH strain and human breast cancer were studied by MTT assay .

【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R382.5

【参考文献】