重组烟曲霉二肽基肽酶Ⅴ片段的原核表达

发布时间：2018-02-16 17:09

  本文关键词： 烟曲霉 二肽基肽酶Ⅴ 肽段 原核表达　出处：《临床检验杂志》2013年09期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的筛选抗原性强的烟曲霉二肽基肽酶Ⅴ(dipeptidyl peptidasesⅤ,DPPⅤ)肽段并进行原核细胞表达。方法通过生物信息学分析技术,从DPPⅤ全长序列中选取抗原决定簇密集的片段,采用生物合成和PCR技术,获得其肽段相应的DNA序列,并克隆至测序载体;DNA测序验证后构建重组表达质粒,转染原核表达宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后用Talon亲和层析柱纯化;western blot分析产物免疫反应性。结果 DPPⅤ19～144p及DPPⅤ145～447p在大肠埃希菌中均以包涵体形式表达,DPPⅤ19～447p以可溶性蛋白质形式表达。western blot结果表明筛选出的DPPⅤ肽段均可与侵袭性曲霉病(IA)患者血清发生抗原抗体反应。结论成功表达烟曲霉二肽基肽酶不同抗原决定簇分布的3个肽段,且重组片段均具有良好免疫反应性。
[Abstract]:Objective to screen the peptide fragment of dipeptidyl peptidases 鈪，

本文编号：1516019