蛋白激酶Wee1B在小鼠1-细胞期受精卵中的表达及其定位

发布时间：2018-03-21 12:40

  本文选题：WeeB　切入点：Wee蛋白　出处：《吉林大学学报(医学版)》2013年05期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的:检测小鼠1-细胞期受精卵各个细胞周期中蛋白激酶Wee1B的表达水平及其定位水平,初步阐明Wee1B对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制。方法:超排卵获得小鼠1-细胞期受精卵,收集卵细胞后用RT-PCR和Western blotting方法检测Wee1B的mRNA和蛋白表达水平;放射自显影测定Wee1B活性;间接免疫荧光观察Wee1B在各个细胞时期的定位。结果:小鼠1-细胞期受精卵G1、S、G2和M期Wee1BmRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P0.05);S、G2和M期Wee1B蛋白表达量与G1期比较差异有统计学意义(P0.01);与G1期比较,S、G2期Wee1B活性逐渐增高(P0.05,P0.01),M期Wee1B活性迅速下降(P0.01)。G1期和S期细胞Wee1B蛋白偶联的红色荧光信号主要集中分布于细胞核,但在G2期细胞红色荧光信号弥散分布于细胞浆,在M末期和2-细胞期可见红色荧光信号又重新分布于细胞核,细胞浆内荧光减弱。结论:蛋白激酶Wee1B在小鼠1-细胞期受精卵各个细胞周期动态表达,Wee1B蛋白存在核浆转位,Wee1B的定位变化可能调控小鼠受精卵有丝分裂。
[Abstract]:Objective: to detect the expression and localization of protein kinase Wee1B in each cell cycle of mouse 1-cell fertilized egg. Methods: mouse 1-cell fertilized eggs were obtained by superovulation, and the expression levels of mRNA and protein of Wee1B were detected by RT-PCR and Western blotting. Wee1B activity was measured by autoradiography. Indirect immunofluorescence was used to observe the localization of Wee1B in different cell stages. Results: there was no significant difference in the relative expression of Wee1BmRNA in G _ 1, S _ 1, G _ 2 and M phases of mouse 1-cell fertilized eggs. There was no significant difference in the expression of Wee1B protein between G _ 1 phase and G _ 1 phase. Compared with G1 phase, the activity of Wee1B in G _ 2 phase increased gradually, the Wee1B activity in P _ (0.05) P _ (0.01) G _ (-1) phase decreased rapidly, and the red fluorescence signal of Wee1B protein coupling in S phase cells was mainly distributed in the nucleus. However, in G2 phase, the red fluorescence signal was distributed in the cytoplasm, and in the late M and 2-cell phase, the red fluorescence signal was redistributed in the nucleus. Conclusion: the dynamic expression of protein kinase Wee1B in each cell cycle of 1-cell stage of mouse fertilized eggs may regulate the mitosis of mouse fertilized eggs by the localization change of nuclear and cytoplasmic translocation of Wee1B protein.
【作者单位】： 中国医科大学生物化学与分子生物学教研室;辽宁医学院发育生物学教研室;辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金资助课题(81270654,81270698) 辽宁省教育厅科研基金资助课题(L2012303)
【分类号】：R341

【共引文献】

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