荧光激活细胞分选转基因标记斑马鱼神经元

发布时间：2018-04-23 20:21

  本文选题：斑马鱼 + 转基因　； 参考：《生物技术通报》2013年11期

【摘要】：对常规试验方法加以改进,使之适用于斑马鱼脑部荧光标记神经细胞的分选。以lhx5∶Kaede转基因株系为例,利用转基因斑马鱼脑部制备单细胞悬液进行荧光激活细胞分选(Fluorescence-activated cell sorting,FACS),获得lhx5荧光标记细胞。提取总RNA后进行基因芯片分析从而了解lhx5标记神经元的基因表达特性。结果显示,通过本流程可成功制备斑马鱼幼鱼脑部单细胞悬液,lhx5∶Kaede平均荧光阳性率为6%。提取RNA质量及总量均能满足基因芯片要求。基因芯片结果显示lhx5及其他标记分子的表达均得到了显著富集。有效地分离斑马鱼幼鱼中枢神经系统荧光标记细胞,可用于特定细胞群的基因表达谱分析。
[Abstract]:The conventional test method was improved to be suitable for the sorting of nerve cells labeled with fluorescence in zebrafish brain. Using lhx5:Kaede transgenic strain as an example, single cell suspension was prepared from the brain of transgenic zebrafish for fluorescence activated cell sorting (FAC) and lhx5 labeled cells were obtained. The gene expression characteristics of lhx5 labeled neurons were analyzed by gene chip analysis after total RNA extraction. The results showed that the average fluorescence positive rate of single cell suspension in brain of juvenile zebrafish was 6%. The quality and quantity of RNA extracted can meet the requirement of gene chip. The results of gene chip showed that the expression of lhx5 and other marker molecules were significantly enriched. Fluorescent labeled cells in central nervous system of juvenile zebrafish were effectively isolated and could be used for gene expression profiling of specific cell groups.
【作者单位】： 复旦大学脑科学研究院;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(30970948)
【分类号】：R329

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：1793496