CytoTrap酵母双杂交筛选与乙型肝炎病毒HBx蛋白相互作用的肝细胞蛋白

发布时间：2018-05-05 04:04

  本文选题：HBx蛋白 + CytoTrap酵母双杂交　； 参考：《南方医科大学学报》2013年04期

【摘要】：目的筛选与乙型肝炎病毒HBx蛋白发生相互作用的肝细胞蛋白。方法构建诱饵重组载体pSos-HBx,经测序正确后将其转化酵母菌cdc25Hα中,检测其在酵母中的表达及有无自激活作用,并利用CytoTrap酵母双杂交的方法筛选与诱饵蛋白HBx相互作用的肝细胞蛋白。结果获得重组诱饵质粒pSos-HBx,验证可以在酵母中表达诱饵蛋白Sos-HBx,且诱饵质粒在此系统中没有自激活作用。利用此系统筛选出6个能与HBx相互作用的肝细胞蛋白,分别为纤连蛋白1、翻译调控肿瘤蛋白1、核受体结合蛋白IQ-WD1、软泡抑素、血清类粘蛋白1、二硫化物异构酶家族A3。结论成功克隆出乙型肝炎病毒HBx蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBx蛋白在肝炎或肝癌过程中发挥的作用提供了新线索。
[Abstract]:Objective to screen hepatocyte proteins interacting with hepatitis B virus HBx protein. Methods the recombinant bait vector pSos-HBxwas constructed and transformed into yeast cdc25H 伪 by sequencing correctly. The expression and self-activation of pSos-HBxwas detected in yeast, and the hepatocyte proteins interacting with decoy protein HBx were screened by CytoTrap yeast two-hybrid method. Results Recombinant bait plasmid pSos-HBxwas obtained. It was verified that the bait protein Sos-HBxcould be expressed in yeast, and the decoy plasmid had no self-activation in this system. Six hepatocyte proteins, fibronectin 1, translator-regulated tumor protein 1, nuclear receptor binding protein IQ-WD1, soft endostatin, serum mucin-like protein 1, disulfide isomerase family A3, were screened by this system. Conclusion the successful cloning of hepatitis B virus HBx binding protein provides a new clue for the further study of the role of HBx protein in the process of hepatitis or liver cancer.
【作者单位】： 昆明理工大学生命科学与技术学院;
【基金】：国家自然科学基金(30960346,81260248) 国家科技支撑计划项目(2009BAI83B02-21,2011BAI15B01-21,2012BAI39B01)~~
【分类号】：R373

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本文编号：1846101