华通胶间充质干细胞低温保存后生物学特性研究

发布时间：2018-05-13 14:20

  本文选题：华通胶 + 间充质干细胞　； 参考：《中国实验血液学杂志》2013年01期

【摘要】：本研究旨在探讨低温保存对华通胶间充质干细胞(WJ-MSC)生物学特性的影响,为低温保存后WJ-MSC的临床应用及建立WJ-MSC库提供实验依据。通过脐带组织块培养制备WJ-MSC,将第5代WJ-MSC加入低温保护剂,-80℃冰箱降温,液氮保存。细胞复温后行培养和传代,低温保存组第1代(PP1)传代获得PP2-PP15。非低温保存组第6代为对照组第1代(CP1),传代获得CP2-CP15。比较对照组与低温保存组WJ-MSC的有核细胞回收率、台盼蓝拒染率、CCK-8活性、凋亡率、贴壁率、增殖指数、细胞表面抗原、细胞周期和向脂肪细胞、成骨细胞及神经元细胞诱导分化能力。结果表明,WJ-MSC经低温保存,有核细胞回收率为98.2%,台盼蓝拒染率为94.3%,CCK-8活性为91.4%,凋亡率为3.9%,贴壁率为92.6%;PP1较CP1增殖指数明显降低(P0.05),PP2-PP15与相应对照组增殖指数的差异均无统计学显著性;WJ-MSC高表达CD29、CD90、CD44、CD71、CD73、CD105、CD166和HLA-ABC,低表达CD34、CD45和HLA-DR,两组之间差异均无统计学显著性;增殖潜伏期和对数增殖期两组之间差异也无统计学意义;向脂肪细胞、成骨细胞和神经元细胞诱导分化后分别进行油红O、碱性磷酸酶(ALP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色,两组间阳性强度肉眼观察无明显差异;细胞内甘油三酯、ALP和NSE含量两组间也无显著差异。结论:WJ-MSC低温保存后少量细胞(10%)受到损伤,传代培养表明其生物学特性基本保持不变。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the effect of cryopreservation on the biological characteristics of WJ-MSCC in Huatong Gel Mesenchymal Stem cells (MSCs), and to provide experimental evidence for the clinical application of cryopreserved WJ-MSC and the establishment of WJ-MSC library. WJ-MSCs were prepared by culture of umbilical cord tissue block. The fifth generation WJ-MSC was added into the cryogenic protectant (-80 鈩，

本文编号：1883559