hTERT启动子调控的PUMA重组腺病毒的构建与鉴定

发布时间：2018-05-15 10:20

  本文选题：端粒 + 末端转移酶　； 参考：《重庆医学》2013年36期

【摘要】：目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的PUMA基因腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA)及带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒载体(Ad-hTERT-PUMA-EGFP)。方法采用一系列的分子生物学技术将p53正向凋亡调控因子PUMA基因插入hTERT的启动子下游,再将EGFP为分子标记插入到PUMA基因下游,最终将构建好的载体装入腺病毒。双酶切实验证明重组腺病毒载体Ad-hTERT-PUMA和Ad-hTERT-PUMA-EGFP构建是否成功。结果载体均成功转配腺病毒。转染12h后,部分HEK293细胞出现了绿色荧光,可维持到72h。结论成功构建重组腺病毒载体Ad-hTERT-PUMA和Ad-hTERT-PUMA-EGFP。
[Abstract]:Objective to construct human telomerase reverse transcriptase (hTERT) promoter regulated adenovirus vector Ad-hTERT-PUMAand adenovirus vector Ad-hTERT-PUMA-EGFPN with enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene. Methods A series of molecular biological techniques were used to insert p53 PUMA gene into the downstream promoter of hTERT, and then EGFP was inserted into the downstream of PUMA gene. Finally, the constructed vector was inserted into adenovirus. The recombinant adenovirus vectors Ad-hTERT-PUMA and Ad-hTERT-PUMA-EGFP were successfully constructed by double enzyme digestion. Results all the vectors were successfully transformed into adenovirus. After transfection for 12 h, some HEK293 cells showed green fluorescence, which could be maintained until 72 h. Conclusion Recombinant adenovirus vectors Ad-hTERT-PUMA and Ad-hTERT-PUMA-EGFPwere successfully constructed.
【作者单位】： 重庆市肿瘤研究所妇瘤科;
【基金】：重庆市卫生局课题(2011-2-366)
【分类号】：R341

【共引文献】

相关博士学位论文 前1条

1 刘威武;三重靶向CRAd.pE-Smac联合X射线照射对MDA-MB-231细胞的体外杀伤作用[D];吉林大学;2013年

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 何朝荣,刘先军,严世荣,张群林,刘雪琴,王晓勋;骨髓间充质干细胞体外分化过程中端粒酶活性表达及意义[J];实用医学杂志;2003年08期

2 余莉,戴育成,袁兆康,李洁;稀土暴露对人外周血单个核细胞端粒酶及细胞凋亡的影响[J];中华预防医学杂志;2004年04期

3 周平,毛高平,房殿春,刘为纹,罗元辉;一种新的人端粒相关蛋白T-STAR的克隆及功能分析[J];空军总医院学报;2003年02期

4 宋敏,米小轶,李柏林,朱继江,高英贤,崔爽,宋继谒;端粒酶基因在乳腺导管不典型增生中的表达[J];中华病理学杂志;2002年01期

5 欧阳小明,程瑞雪,冯德云,郑晖;丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3对端粒酶活性的影响[J];中华病理学杂志;2001年06期

6 梁光萍 ,罗向东 ,杨宗城;hTERT基因转染对人胚胎成纤维细胞端粒长度、端粒酶活性及其亚单位的影响[J];解放军医学杂志;2003年08期

7 谢金卫;周俊梅;杜贻鹏;陈展辉;卢长娣;陶莎;周俊宜;;端粒酶活性及其hTERT基因在增生性组织中的表达[J];实用医学杂志;2006年07期

8 温淑娟,况二胜,黄镇华;端粒重复序列扩增法结合微孔板杂交法定量检测端粒酶活性[J];第一军医大学学报;2001年06期

9 徐燕;慕晓玲;;端粒酶与骨髓间充质干细胞[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年07期

10 纪冬;游绍莉;辛绍杰;;端粒酶的研究进展[J];军医进修学院学报;2010年05期

相关会议论文 前10条

1 ;A unique point mutation in the fibroblast growth factor 9 gene (FGF9)defines a new Multiple Synostosis Syndrome in a large Chinese family[A];中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会论文汇编集[C];2007年

2 赵寿元;;从遗传学谈优生优育[A];中国优生优育协会第四届全国学术论文报告会暨基因科学高峰论坛论文专辑[C];2008年

3 周莉;李树蕾;陈辉;黄可欣;聂毓秀;;混合稀土常乐对大鼠胚胎潜在的遗传学影响[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

4 朱平;;医学遗传和遗传咨询中伦理问题的国际准则[A];中国优生科学协会2004年优生科学学术交流大会论文集[C];2004年

5 陈争;张永科;范安;张亚男;武艳平;赵倩君;周璨林;毛新民;藏玉亮;叶尔哈孜;哈森别克;爱哈布德力;卡马力亚;梁玲;古力努尔;马月辉;饶绍奇;;利用Y染色体非重组区多态探究新疆阿勒泰地区图瓦人与邻近人群的遗传学关系[A];第八次全国医学遗传学学术会议(中华医学会2009年医学遗传学年会)论文摘要汇编[C];2009年

6 关景芳;高萍;姜华;;V79细胞HGPRT基因位点突变实验在医疗器械遗传毒性评价中的应用[A];天津市生物医学工程学会2006年学术年会论文摘要集[C];2006年

7 宣煦;李静;王朝辉;;治疗师家谱图分析体验与督导[A];2004医学心理、军事心理、康复心理、医学心理教育学术研讨会论文汇编[C];2004年

8 ;Disruption of palladin leads to defects in definitive erythropoiesis by interfering erythroblastic island formation in mouse fetal liver[A];中国遗传学会“发育、遗传和疾病”研讨会论文汇编集[C];2007年

9 李巍;贺敏;;我国遗传教育、遗传咨询与遗传检测若干问题初探[A];遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集[C];2007年

10 尚虹;席焕久;;古病理学研究的发展[A];解剖学杂志——中国解剖学会2002年年会文摘汇编[C];2002年

相关重要报纸文章 前10条

1 本报记者 殷赅;“基因解码”:欲治人病者 自己病倒[N];第一财经日报;2008年

2 丁香;遗传研究 热浪滚滚[N];医药经济报;2007年

3 记者　董映璧;染色体结构差异决定人的特征[N];科技日报;2006年

4 ;受环境和营养因素影响,人体基因组会随年龄改变[N];新华每日电讯;2008年

5 记者 李天舒;人类外显子区域精细遗传图谱绘出[N];健康报;2010年

6 钱铮;癌症基因也有“两面派”[N];健康报;2005年

7 本报记者 王丹;基因检测时代是否真的到来？[N];健康报;2008年

8 韩成;一个基因缺陷导致两种免疫病[N];中国医药报;2005年

9 齐海山 王春艳;我国一男性异常染色体核型被确认为全球首例[N];医药经济报;2005年

10 本版编辑 颜亮 楚君　任海军;“沉默”是金[N];医药经济报;2006年

相关博士学位论文 前5条

1 周华友;人类RH基因结构与遗传特点研究[D];第一军医大学;2004年

2 顾绍庆;细胞因子基因多态性与乙型肝炎病毒宫内感染相关性的研究[D];复旦大学;2004年

3 程轶U，

本文编号：1892061