怒情绪应激对大鼠血管内皮生长因子（VEGF）的影响及肝方药干预作用

发布时间：2018-05-20 23:29

本文选题：愤怒 + 郁怒　；参考：《山东中医药大学》2015年博士论文

【摘要】：目的:探讨怒情绪应激对VEGF/VEGFR2及其介导的PI3K/AKt/m TOR信号通路的影响。方法:本研究采用社会隔离结合居住入侵范式,建立诱发怒(愤怒anger-out、郁怒anger-in)情绪反应大鼠模型,应用电镜、免疫荧光、放射性受体配体结合、ELISA、Real-time PCR、Western-Blot等技术,进行愤怒郁怒大鼠模型海马VEGF含量变化及神经可塑性研究;愤怒郁怒大鼠模型海马VEGF与VEGFR2受体结合情况研究;愤怒郁怒大鼠海马PI3K/AKt/m TOR信号通路的变化情况研究。结果:(1)造模一周后高攻击组(High Aggressive,HA)组大鼠攻击行为得分均较低攻击组(Low Aggressive,LA)组显著上升,而攻击行为潜伏期则显著缩短。两组旷场得分较对照组均显著升高。两组糖水偏好系数与对照组比较无显著性差异。(2)电镜结果显示,造模组血脑屏障结构联结不紧密、突触连接减少。说明怒情绪导致神经血管单元损伤、突触超微结构受损,氟西汀、白香丹及舒郁胶囊干预后可显著改善。(3)免疫荧光结果显示,对照组大鼠海马CA3区及额叶有大量VEGFR2阳性细胞,排列整齐;而居住-入侵范式应激大鼠海马CA3区及额叶VEGFR2阳性细胞减少,排列不规则,给予氟西汀及白香丹、舒郁后得以改善。(4)ELISA显示,愤怒及郁怒组较对照组及给药组,海马VEGF含量显著降低;给予氟西汀、调肝方药白香丹及舒郁胶囊后均显著改善VEGF含量降低。放射性受体配体结合实验显示,怒情绪应激致VEGFR2与特异性配体结合活性显著降低。给予氟西汀及调肝方药白香丹、舒郁胶囊后得以纠正。Real-time PCR显示,模型组较对照组,海马及额叶VEGF m RNA表达显著降低,给药组能显著改善怒情绪应激导致的这一改变;而两脑区VEGFR2 m RNA各组间无显著性差异。怒情绪应激致愤怒组VEGFR2蛋白表达降低,郁怒组无显著差异,且白香丹作用显著,而氟西汀作用不明显;pm TOR表达显著降,且只有白香丹作用显著,而tm TOR中,只有郁怒组显著降低,且白香丹、舒郁作用均不明显;愤怒组PI3Kpp85表达显著升高,而郁怒组降低,且白香丹、舒郁均有改善作用,愤怒、郁怒组t PI3Kp85均无显著改变;愤怒、郁怒组p AKt均显著升高,且只有舒郁胶囊作用显著。愤怒、郁怒组t AKt均显著升高,且只有舒郁胶囊作用显著。(5)白香丹及舒郁胶囊含药血清可显著升高体外培养原代海马神经元VEGFR2表达。结论:怒情绪应激影响VEGF/VEGFR2及其介导的PI3K/AKt/m TOR信号通路,而损伤其神经发生。调肝方药在行为学及分子基础上有较好的改善作用,为阐明中医“肝疏泄失常”生物学基础及调肝方药作用机制提供新的分子证据。
[Abstract]:Objective : To investigate the effect of irritable mood stress on VEGF / VEGFR2 and the pathway of kinase / AKt / m TOR . ( 4 ) The expression of VEGF in hippocampus and hippocampus was significantly lower than that of control group , and the expression of VEGF in hippocampus and frontal lobe decreased significantly .
【学位授予单位】：山东中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R395

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