miRNA-144靶向调节钙粘蛋白11对间充质干细胞成骨分化的抑制效应
本文选题:miRNA- + 钙粘蛋白 ; 参考:《第三军医大学学报》2013年10期
【摘要】:目的证实miRNA-144靶向调节钙粘蛋白11(Cad-11)表达,抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)的成骨分化。方法通过双荧光素酶报告系统对Cad-11与miRNA-144的靶基因关系进行鉴定;将pre-miR-144及anti-miR-144分别转染MSCs,成骨诱导7、14 d后,实时定量PCR和蛋白印迹方法检测细胞中Cad-11及成骨标志物Runx2、ALP的表达情况,分析其与MSCs成骨分化的变化关系。黏附实验检测miRNA-144对MSCs成骨分化过程中黏附的影响。结果 Cad-11是miRNA-144的靶基因;miRNA-144在成骨诱导第7、14天可明显抑制Cad-11、Runx2和ALP的表达(P0.05),同时降低MSCs的黏附性。结论 miRNA-144通过抑制Cad-11的表达对间充质干细胞的成骨分化起负向调控的作用。
[Abstract]:Objective to demonstrate that miRNA-144 can inhibit the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells by regulating the expression of cadherin 11 (cadherin). Methods the target gene relationship between Cad-11 and miRNA-144 was identified by double luciferase reporting system, pre-miR-144 and anti-miR-144 were transfected into MSCs, and the expression of Cad-11 and the osteoblastic marker Runx2 were detected by real-time quantitative PCR and Western blotting after 714 days of osteogenesis induction. To analyze the relationship between MSCs and osteogenic differentiation. The effect of miRNA-144 on the adhesion of MSCs during osteogenic differentiation was detected by adhesion experiment. Results Cad-11 was the target gene of miRNA-144, miRNA-144 could significantly inhibit the expression of Cad-11G Runx2 and ALP on the 714th day of osteogenesis, and decrease the adhesion of MSCs. Conclusion miRNA-144 plays a negative role in the osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells by inhibiting the expression of Cad-11.
【作者单位】: 第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室 重庆市生物力学重点实验室;成都军区总医院骨科;
【基金】:国家重点基础研究发展计划(973计划,2011CB964701) 国家自然科学基金(30872636,81271980)~~
【分类号】:R329
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,本文编号:1985881
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