人凋亡诱导因子C-末端截短体AIFΔ1-480的表达对MCF-7细胞的影响

发布时间：2018-06-22 21:19

  本文选题：AIFΔ- + MCF-细胞　； 参考：《南方医科大学学报》2013年09期

【摘要】：目的观察人亡诱导因子(AIF)C-末端端截短体AIFΔ1-480重组基因表达对MCF-7细胞生物学行为的影响。方法利用脂质体将重组质粒PcDNA3.0-FDT-AIFΔ1-480瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞,通过Western blot、流式细胞术、MTT、集落形成试验、线粒体膜电位测定等方法,检测目的基因在细胞中的表达及其对转染细胞凋亡相关分子cytC表达的变化及细胞增殖、凋亡等的影响。结果重组质粒PcDNA3.0-FDT-AIFΔ1-480转染肿瘤细胞后AIF蛋白表达明显增加;重组质粒能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖;上调细胞色素C的表达;减低线粒体膜电位,正常细胞、空载体组和重组质粒的线粒体膜电位(Δψ)分别为4.69±1.07、3.86±1.52和1.51±0.79 mV,重组质粒组与对照组相比,线粒体膜电位明显下降(P0.05);并诱导细胞凋亡,正常细胞组、脂质体组、PcDNA3.0组、重组质粒组细胞凋亡率分别为:(9.2±5.1)%、(15.4±4.5)%、(20.5±3.9)%、(32.2±6.0)%,重组质粒组与对照组相比,细胞凋亡明显增加(P0.05)。结论人AIF C-末端端截短体可通过诱导cytC从线粒体中释放促进MCF-7细胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of AIF 螖 1-480 recombinant gene expression on the biological behavior of MCF-7 cells. Methods the recombinant plasmid PcDNA3.0-FDT-AIF 螖 1-480 was transiently transfected into breast cancer MCF-7 cells by liposome. Western blot, flow cytometry, colony forming test and mitochondrial membrane potential measurement were used. The expression of target gene in cells and its effect on the expression of apoptosis-related molecule cyt C and cell proliferation and apoptosis in transfected cells were detected. Results the expression of AIF protein increased after transfection of recombinant plasmid PcDNA3.0-FDT-AIF 螖 1-480, the recombinant plasmid inhibited the proliferation of breast cancer MCF-7 cells, upregulated the expression of cytochrome C, reduced mitochondrial membrane potential, and decreased the expression of cytochrome C in normal cells. The mitochondrial membrane potential (螖 蠄) of the empty vector group and the recombinant plasmid were 4.69 卤1.07 卤3.86 卤1.52 and 1.51 卤0.79 MV, respectively. The mitochondrial membrane potential in the recombinant plasmid group was significantly lower than that in the control group (P0.05), and apoptosis was induced in the normal cell group, liposome group and PcDNA3.0 group. The apoptotic rates of the recombinant plasmid group were (9.2 卤5.1), (15.4 卤4.5), (20.5 卤3.9) and (32.2 卤6.0), respectively. The apoptosis rate of the recombinant plasmid group was significantly higher than that of the control group (P0.05). Conclusion Human AIF C-terminal truncated body can promote apoptosis of MCF-7 cells by inducing cyt C release from mitochondria.
【作者单位】： 西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤中心肿瘤科;
【基金】：国家自然科学基金(81072117)~~
【分类号】：R363

【参考文献】

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本文编号：2054263