过量表达LMO2对成血管细胞增殖和造血分化的作用

发布时间：2018-08-11 17:30

【摘要】：目的利用小鼠胚胎干细胞进行体外造血细胞分化,研究LMO2蛋白在成血管细胞分化过程中的作用。方法构建小鼠成血管细胞特异性表达lmo2或绿色荧光蛋白的表达载体,分别转染小鼠胚胎干细胞。经过筛选获得细胞克隆进行自发分化以形成胚胎体。收集分化0～12 d的胚胎体细胞,检测造血细胞相关基因的表达;利用EB细胞进行细胞集落形成实验及血细胞集落形成单位实验,并统计集落形成数。结果成功构建了成血管细胞特异性表达目的基因的表达载体,转染目的基因的小鼠胚胎干细胞在其分化中产生的成血管细胞可特异表达目的基因。过量表达lmo2能够促进造血相关基因的表达,所产生细胞集落数是对照组的2倍,晚期造血分化的血细胞集落形成单位总数是对照组的2.5倍,其中红系集落单位数是对照组的3倍。结论在成血管细胞中过量表达LMO2,促进其细胞增殖及其造血细胞分化。
[Abstract]:Objective to study the role of LMO2 protein in the process of angioblast differentiation by using mouse embryonic stem cells to differentiate hematopoietic cells in vitro. Methods the expression vector of lmo2 or green fluorescent protein was constructed and transfected into mouse embryonic stem cells. After screening, cell clones were obtained for spontaneous differentiation to form embryoids. Embryonic somatic cells were collected for 12 days of differentiation to detect the expression of hematopoietic cell related genes, and EB cells were used to carry out colony formation test and blood cell colony forming unit test, and to count the colony formation number. Results the expression vector of the target gene was successfully constructed, and the target gene could be specifically expressed by the angioblast produced by the mouse embryonic stem cells transfected with the target gene. Overexpression of lmo2 could promote the expression of hematopoietic related genes, and the number of colony forming units in late hematopoietic differentiation was 2. 5 times as much as that in the control group, and the number of colony forming units in late hematopoietic differentiation was 2. 5 times as much as that in the control group. The number of colony units of red line was 3 times as much as that of control group. Conclusion LMO2 is overexpressed in angioblasts to promote cell proliferation and hematopoietic differentiation.
【作者单位】： 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室;安徽医科大学附属省立医院儿科;中国医学科学院
【基金】：国家自然科学基金(81172591) 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室开放课题(2060204) 安徽医科大学博士学术、科研活动资助项目(XJ200801)~~
【分类号】：R329

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2177721