鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备
[Abstract]:The flagellin gene fliC, of Salmonella typhimurium was amplified by PCR and ligated to the prokaryotic expression vector pET28a (). It was sequenced and transformed into E. coli BL21 (DE3) pLysS competent cells, and the prokaryotic expression system was constructed. After induced by 1mmol/L isopropyl- 尾 -D-thiogalactoside (IPTG) and purified by Ni-NTA, the molecular weight of the purified label with 6 脳 His was about the expression product of 54.6kD, which was consistent with the predicted protein size. Most of the expressed products were further identified by Western-blotting in soluble form. The results showed that the protein could react specifically with the monoclonal antibody against His tag. The purified fusion protein was used to immunize BALB/c mice. The polyclonal antibody was obtained and the titer and specificity of the antiserum were detected. The results showed that the polyclonal antibody had higher titer and better specificity.
【作者单位】: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所农业部农产品质量安全重点实验室;南京农业大学食品科技学院肉品加工与质量控制教育部重点实验室;中国检验检疫科学研究院;
【基金】:国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-42) 国家自然科学青年基金项目(31000799) “十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD28B03)
【分类号】:R378
【参考文献】
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【共引文献】
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